3,4-Dihydroxytoluene Inhibits Epidermal Growth Factor-induced Cell Transformation in JB6 P+ Mouse Epidermal Cells by Suppressing Raf-1

서지정보

ㆍ발행기관 : 한국식품영양학회 ㆍ수록지정보 : 한국식품영양학회지 / 28권 / 1호
ㆍ저자명 : Kim, Ji An, Kim, Ji Hye, di Ruccio, Eric, Kang, Nam Joo

목차

Introduction
Materials and Methods
1. Chemicals
2. Cell culture
3. Cell proliferation assay
4. Anchorage-independent transformation assay
5. Luciferase assay for AP-1 transactivation
6. Western blotting
7. In vitro Raf-1 kinase assay
8. In vitro and ex vivo Raf-1 pull-down assay
9. ATP and DHT competition assays
10. Docking and modeling
11. Statistical analysis
Results
1. DHT has no toxic effect on JB6 P+ cells
2. DHT inhibits EGF-induced neoplastic transformation
3. DHT attenuates EGF-induced AP-1 transactivation
4. DHT strongly inhibits Raf-1 kinase activity in vitro
5. DHT binds with Raf-1 in vitro and ex vivo
Discussion
Summary
Acknowledgments
References

한국어 초록

이전 연구들에서 rutin과 quercetin을 포함한 여러 flavonoids의 암예방 활성이 보고되었으나, rutin의 경우 섭취 시 체내에서 HVA, HPAA, DHT라는 대사체로 변형되어 흡수된다. 그러나, 이들 대사체와 관련한 암예방 효능 및 그 분자생물학적 작용기작에 대한 연구 결과는 보고된 바가 없어, 본 연구에서 이를 규명하였다. DHT는 EGF로 유도된 세포 변형을 억제하였으며, AP-1 전사인자의 활성 또한 억제하였다. DHT는 Raf-1 효소 활성을 효과적으로 저해하므로서 MEK 및 ERK의 인산화를 억제하였으며, Raf-1과 ATP는 비경쟁적으로 직접 결합하여 Raf-1 효소 활성을 저해한다는 사실을 밝혀내었다. 이와는 대조적으로, rutin은 EGF로 유도된 세포 변형, AP-1 활성, ERK 신호전달체계, Raf-1 효소 활성을 억제하지 못하였다. 이상의 연구결과는 DHT의 암예방 활성이 발암과정과 밀접한 연관이 있는 Raf-1 효소 활성을 억제하여 세포 변형을 억제하는 것과 관련되어 있다는 것을 제시한다.

영어 초록

In summary, the rutin metabolite DHT significantly reduced EGF-induced neoplastic transformation in JB6 P+ cells. This inhibition was mediated mainly by blocking the Raf/MEK/ERK signaling pathway and subsequent suppression of AP-1 activities. DHT attenuated Raf-1 kinase activity by directly binding to Raf-1 in vitro and ex vivo. Taken together, these results suggest that Raf-1 may be a critical molecular target to suppress DHT-induced neoplastic transformation, which is mainly attributable to the chemopreventive potential of several foods containing rutin.

참고 자료

없음