김치에서 젖산균 배양 (Isolation of LAB from kimchi)

소개글

김치에서 젖산균을 배양한 미생물실험입니다.
도움 되셨으면 좋겠습니다.

목차

1. Introduction
2. Materials & Methods
3. Results & Discussion
4. Homework: 젖산균의 선택적 분리를 위한 선택적 배지의 구성

본문내용

1. Introduction
이번 실험은 김치에 존재하는 젖산균을 분리해 내기 위해, 배지(cultural medium)를 만들고 도말(streaking)하여 배양하는 것으로 이로써 젖산균의 single colony를 분리해 낼 수 있다. 김치 1㎖에는 최대 10⁸~⁹ 개의 유산균이 존재하는데 대부분이 젖산균이다. 금방 담근 김치는 일반세균이 최대 10배까지 급속히 증식하다가 이산화탄소가 포화상태에 이르러 더 이상 세균이 살 수 없는 상태가 되어서 공기가 없어도 살 수 있는 혐기성 미생물인 젖산균만이 남게 된다. 젖산균은 박테리오신이라는 항생물질을 만들어 이 때 생겨나는 다른 미생물을 자라지 못하게 방어한다. 김치 속 젖산균의 성장은 네 단계로 나눌 수 있는데, 처음에는 비교적 내산성이 약한 Leuconostoc mesenteroides가 생존하지만 김치가 익을수록 Enterococcus faecium, Pediococcus acidilactici 와 같은 구균이 생존한다. 김치가 완전히 익게 되면 산에 가장 Leuconostoc plantarum와 같은 간균만 남게 된다. 구균은 주로 젖산과 에탄올 등 여러 유기물을 생산하지만, 간균은 주로 젖산만을 생성함으로 김치가 익을수록 시큼털털해지는 이유가 바로 이 때문이다. 그러나 점차 신맛이 강해지면서 젖산균조차 적응을 하지 못하고 사멸하게 되는데 이때가 되면 효모가 증식하게 되고 흔히 말하는 `군내`가 나기 시작한다. 이와 같이 pH에 따라 균의 조성이 달라지는 발효를 successive fermentation라 한다.
배지는 미생물이나 동식물의 조직을 배양하기 위하여 배양체가 필요로 하는 영양물질과 특수한 목적을 위한 물질을 넣어 혼합한 것이다. 배지의 분류는 성분의 성상에 따라 화학조성이 명확하지 않은 천연우유, 감자, 혈액, 토마토액 등을 사용하는 자연배지(natural medium), 미생물을 인공적 증식시키기 위해 영양분의 인위적 조성, 농도 등을 구명할 수 있는 합성배지(syntheic medium), 고분자 물질은 들어있지 않으나 단백질의 완전 가수분해물을 주성분으로 한 반합성배지(semisyntheic medium)로 나눌 수 있고, 사용목적에 따라 분류하면 특정한 미생물의 생육을 위해서 다른 미생물의 생육을 억제함으로써 선택적으로 배양하는 선택배지(selective medium), 여러 가지 미생물이 혼합하여 있는 경우에 다수의 균종이 생육할 수 있도록 된 일반 증식배지(blood broth, 한천배지)와 한 종류의 미생물이 선택적으로 생육할 수 있도록 특별한 영양분 조성으로 만든 특수한 증식배지(enrichment medium), 배지에 특수한 생화학적 지시약을 넣어 줌으로써 한 종의 미생물을 다른 종과 구별 할 수 있게 하는 감별배지(differential medium)로 나눌 수 있다. 형상에 의해 분류하면 액체배지, 반고체 배지, 고형배지로 나뉠 수 있다. 고형배지는 한천, 혈청, 난 등을 사용하여 고형화한 배지로 평판배지, 시험관에 배지가 약 45경사가 되도록 굳힌 것으로 세균의 증식, 보존을 위한 사면배지와 시험관을 수직으로 유지한 상태에서 배지를 굳힌 것으로 주로 세균의 성상검사, 균주의 보존, 세균의 운동성 등에 이용되는 고층배지가 있다

참고 자료

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http://blog.naver.com/killer3br?Redirect=Log&logNo=39054805