단백질 분석(예비)

소개글

SDS-PAGE를 통해 재조합 단백질이 monomer인지 oligomer인지를 구별하며
oligomer의 수와 각 monomer의 분자량을 결정하는 방법을 익힌다.
SPR을 통해 재조합 단백질의 ka, kd KD값을 계산한다.

목차

◆ 실험 목적
◆ 실험 재료
◆ 실험 원리

본문내용

◆ 실험 재료


․ Tris-HCl buffer
DNA가 외부로 유출 되었을 때 안정성의 문제가 생긴다. 그래서 적정한 Ion강도와 pH가 필요로 하는데, 이때 Tris-HCl buffer가 DNA 보호역할을 해 준다. 대부분의 효소가 acivation되기 위해서는 금속 이온을 필요로 하는데 그러한 금속이온을 잡아 주기위해 첨가.


․ SDS
ionicdetergent로 세포막을 깨는 일을 한다.


․ TEMED (N,N,N`,N`-tetramethylethylenediamine)
Acrylamide 단량체를 중합하기 위해 넣어주는 촉매제. TEMED는 persulfate로부터 자유라디칼의 생성을 촉매함으로써 중합을 개시한다.


․ Ligand : DR5
DR5는 최근에 밝혀진 TNFR family member 들이다. 이들은 type 1 membrane protein 들로서 cytoplasmic domain에 apoptosis를 일으키느 s분자들을 recruit하는 death domain을 가지고 있는 것이 특징이다.
TRAIL의 자극에 대한 receptor로서 많은 암세포에서 apoptosis를 유발하는 반면, 정상세포에서는 apoptosis를 유발하지 않는다.


․ Sensor chip CM5
가장 다양하게 응용할 수 있는 chip으로써 sensor chip 표면이 carboxymethyl화된 덱스트란으로 되어 있다. NHS 또는 EDC로 쉽게 활성이 되며, amin coupling방법으로 생물학적 활성의 감소 없이 고정화가 가능하다.

참고 자료

- 생명공학실험1, 아주대학교, 2007, pp.35-45.

- 생물공학, 고정삼․고영황․오남순, 광일문화사, 2001, pp.65-p71.

- 발효공학, 성낙계, 형설출판사, 1999, pp.74-75.

- 효소화학, 안용근, 청문각, 1993, pp.98-100.

- 분자생물학, 박상대, 라이프사이언스, 2003, pp.66-71.

- 최신 환경 미생물학, 송홍규 오계헌, 東和, 1994, pp.121-123.

- 미생물공학, 전홍기 외, 도서출판 동화, 2001, pp.89-91.

- 발효 공학, 김영만 외, 유림문화사, 1997, pp.101-102.