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Transformation

*오*
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최초 등록일
2009.06.15
최종 저작일
2009.05
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소개글

vector와 CP cell을 사용해서 transformation을 해보자

목차

1. Subject: Transformation
2. Object: vector와 CP cell을 사용해서 transformation을 해보자.
3. Introduction
4. Materials
Kanamycin plate, vector(pET28a), CP cell(dh5a), incubator, heat block, LB, pipette, micro tube
5. Methods
6. Result
7. Discussion
8. References

본문내용

*pET28a의 경우, 자체의 promoter을 소유하고 있습니다. IPTG의 농도를 조절함으로써, protein의 발현 을 조절할 수 있습니다. 발현 양을 조절하는 이유는 내가 target으로 ...

*E.coli에는 발현이 안 되는 protein이 있는 유전자를 cloning해서 발현시킬 경우, host cell에 영향을 미칠 수 있는데, 적게 발현시켜서 cell에 영향을 줄여줍니다.
*pET28a에는
....

transformation 중에서 Chemical treatment를 처리해서 실험을 진행합니다....

(1) tube안에 들어있는 50μl의 CP cell에 2μl의 plasmid DNA(우리는 pET28a)를 넣어줍니다.
(2) 이 tube를 20분동안 ice에 보관합니다.
(3) heat block을 사용해서
...

CP cell로는 dh5a를 사용하였으며, plasmid DNA으로는 pED28a를 사용하였습니다.
pED28a에는 kanamycin resistance site가 존재하기 때문에
...

참고 자료

http://club.cyworld.com/club/main/club_main.asp?club_id=53143013
http://rnabio.com/bbs/download.php?id=board1&page=1&sn1=&divpage=1&sn=off&ss=on&sc=on&select_arrange=headnum&desc=asc&no=176&filenum=1

태그

#vector#cp cell#competent cell#Transformation#Conjugation#pET28a#pBR322#In vivo#kanamycin

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