TLC

소개글

생물화학실험-얇은막크로마토그래피 예비 레포트

목차

1. TLC(Thin Layer Chromatography) 란?
2. 실험

본문내용

1. TLC(Thin Layer Chromatography) 란?
TLC는 유기화합물의 순수성을 검사하거나, 반응의 정도를 보기위해서 사용되는 단순하고도 빠른 방법, 이동상은 용매, 정지상은 평평한 지지체에 흡착된 고체로 일반적으로 유리판, 알루미늄박, polyester film 등의 위에 흡착제를 얇은 층으로 붙이고 이것을 고정층으로 하여 PC와 같이 용매로 전개하는 chromatography이다.

TLC의 원리는 다른 column chromatography와 마찬가지로 흡착, 분배, 이온교환 gel 여과 등으로 나눌 수 있겠으나, 주로 흡착 TLC를 이용한다.

(1) 흡착제
-silica gel, alumina, 규조토, cellulose등이 사용하며 column chromatography용 흡착제에 비해 입자가 매우 가늘다.

(2) TLC의 전개 방법
-시료를 적당한 용매에 녹여 외경 약 1mm의 유리 모세관을 이용해서 박층에 sopt한다. 일반적으로 한 개의 시료에 대해서 여러 종류의 농도로 spot하여 test를 해본 뒤 실험하는 것이 좋다. spot한 시료의 양이 너무 많으면 전개할 때 spot가 너무 크게 되거나 tailing이 일어나서 좋은 결과를 얻기 힘들다. 일반적으로 물질의 분리 및 정제를 목적으로 TLC를 사용하는 경우에는 시료를 sopt가 아니라 선상으로 banding하고, 전개후 필요로하는 흡착제를 긁어내어 MeOH나 EtOAc 등 용출력이 강한 용매로 용출시킨다(PTLC).

TLC의 전개는 위의 그림처럼 전개조를 이용하여 상승법을 행하는 것이 일반적이다. 이 때, 전개조 안을 용매로 충분히 포화시켜 놓기 위해서 전개조는 완전히 밀폐되어 있는 것이 좋다. 전개거리는 보통 10～15cm 정도이며 전개가 끝나면 용매선던의 위치를 기록하고 나서 용매를 증발시킨 뒤, 전개된 spot를 검출한다.

참고 자료

없음