탈지분유와 우유로부터의 카제인 추출

목차

1. 실험원리
2. 실험 재료 및 기구
3.실험방법 & 결과
4. 고찰
5. 참고자료
6. 참고문헌

본문내용

1. 실험원리
casein은 우유단백질의 약 80%를 차지한다. Casein은 칼슘 및 인산과 결합된 수용성으로 10% 초산용액을 가하여 PH를 등전점인 4.5~4.6으로 하면 침전되므로 이를 분리할 수 있다.

2. 실험 재료 및 기구
탈지유, 탈지분유
10%초산(CH3COOH)용액, methanol, ether
10% NaOH용액, 1% CuSO4용액
여과지,비커,시험관,스포이드,리트머스시험지,흡입여과기(ULVAC G-50DA),여포

3.실험방법 & 결과
① 탈지유(또는 탈지분유 15g을 8배의 물의 희석한 것) 50ml를 300ml 또는 500ml 비이커에 넣고 40~42℃의 온수 150ml와 혼합하여 10% 초산용액을 가하면서 pH를 등전점인 4.6으로 조정한다.(casein 침전됨)
탈지유에 비해 색이 미색이며 약간 노란빛을 띠며 이것은 케이신과 유청 단백질이 분리된 결과이다. 시간이 좀 더 지나면 흙탕물에 모래와 물이 분리되듯 카제인과 유청단백질의 분리가 확연히 들어났다.

② 천으로 걸러 침전물을 물로 잘 세척한다.
(리트머스시험지로 산성을 띠지 않을 때까지 증류수로 세척한다.)
증류수로 세척한 후 리트머스시험지가 녹색으로 변해 중성임을 확인하였다.

③ ②을 흡입 여과하여 물을 제거한 후 다시 methanol과 ether로 각각 2회씩 흡입여과하면서 세척하여 각 액을 잘 제거한 다음 풍건하면 정제한 casein 분말이 된다.
(＊ether는 지방제거 효과)

④ ③에서 유기용매로 세척한 casein침전물을 증류수로 다시 세척한 다음 단백질의 biuret 반응을 실험한다.

[Biuret 반응시험 : 2가지 방법 ]
A) 건조 시키지 않은 casein 침전물을 2g에 증류수 100ml를 첨가하여 녹인 것 2ml를 시험관에 넣고 여기에 10% NaOH용액 2ml를 가한 후 1%CuSO4 용액 3~4방울 가한다.

참고 자료

1)“참전복의 난황단백질 분리와 특성”
Journal of Aquaculture 11(2) : 271~278(1998)
2) "밀 배아 단백질중 Albumin과 Globulin의 분리에 관한연구"
J.KOREAN SOC. FOOD NUTR 15(2) 128~135 (1986)
3)프로테오믹스 : 단백질에 대한 이해 및 기능 해석의 새로운 접근과 응용
주현, 한진 지음 p41~45