단백질 농도측정 실험 결과보고서

소개글

단백질 농도측정 실험 결과보고서입니당

목차

1. 실험결과
2.고찰

본문내용

이번 실험은 spectrophotometer의 원리를 이해하고, 미지시료의 흡광도를 측정하여 단백질 표준용액을 기준으로 작성된 표준곡선과 비교하여 미지의 단백질 농도를 알아보는 실험이었다.
실험은 단백질 표준용액을 희석하여 준비하는 것부터 시작한다. 실험시에는 standard curve를 만드는 과정은 이미 되어 있었다. standard curve는 이미 농도를 알고 있는 것으로 각 농도의 흡광도를 찍어, 각각의 농도에 따른 흡광도 그래프를 그린 것이다. 그리고 이 curve의 직선식인 y=ax+b를 통해 우리가 알고 싶은 미지농도 단백질의 흡광도를 넣으면, 농도를 구할 수 있게 된다.
UV를 찍을 때 보면 cell이 두면이 매끄러운 것을 볼 수 있다. 이것은 빛이 지나가면서 흡광도를 찍기 때문에 시료에 빛이 통과할 수 있도록 해야 하기 때문이다. 빛이 지나가는 방향이 표시되어 있는 것을 확인하고 그 경로에 맞추어 매끄러운 부분을 넣는다. 또, 이 부분이 지문이나 이물질이 묻지 않도록 해야 정확한 실험을 할 수 있다. 우리조는 실험을 하다가 실수로 만져서 다시 찍기도 했다.
샘플을 찍기 전에 기준인 blank를 찍어준다. 이것은 마치 저울의 영점조절과 같은 것이다. 우리가 찍으려는 미지 시료에 단백질 외에도 다른 성분들이 들어 있는데, 그 성분들을 미리 찍어 기준으로 삼으면 blank를 찍은 이후에는 단백질만 들어 있는 것처럼 순수 단백질 농도만 측정할 수 있게 된다.
미지의 샘플용액을 찍기 위해 표준용액과 염료를 8:2로 혼합하여 UV를 찍었다. 여기서 시료 2번이 흡광도가 1이 넘게 측정이 되었다. 이런 경우 희석해서 다시 측정해주어야 하는데 그 이유는 흡광도-농도 그래프를 그릴 때 흡광도가 1 아래일 때만 비례나 반비례의 모양을 가지기 때문이다.

참고 자료

없음