DNA 추출 및 검출에 대한 조사

소개글

DNA 추출 및 검출에 대한 조사보고서

목차

1. Illustrate the principles of DNA extraction from living cells.
(1) Explain the principles and the methods of Cell lysis.
(2) Explain the principles and the methods of removing contaminants by organic (3) The Others
extraction and enzyme digestion
2. Explain the principles, the methods, and the application of the gel-electrophoresis.
3. Explain the principles and the methods of visualizing DNA molecules in a gel.

본문내용

1. Illustrate the principles of DNA extraction from living cells.
(1) Explain the principles and the methods of Cell lysis.
Cell lysis는 DNA 추출의 첫 단계이다. 세포 추출물을 얻고자 하는 데는 세포막과 세포벽 등 몇 가지 장벽이 있다. 그러므로 세포를 파괴시켜서 이 장벽을 제거해야 한다. 이 방법에는 물리적 방법과 화학적 방법이 있다. 물리적 방법이란 용어 그대로 기계적인 힘으로 파괴하는 것을 말하고, 화학적 방법이란 세포 장벽(cell barrier)를 파괴할 수 있는 화학물질을 사용하는 것을 말한다. DNA 추출을 위해서는 화학적 방법이 보다 일반적으로 사용되고 있다.
먼저, 세균의 경우 cell lysis가 어떻게 이루어지는지부터 설명하겠다.
화학적 방법에는 몇 가지 화학 물질이 사용된다. 이런 물질들을 detergent라고 부른다. 먼저 lysozyme이란 것이 있다. 이는 계란 흰자, 눈물 등에 존재하는 효소로서 세균에서 DNA를 추출하고자 할 때 그 세포벽을 구성하는 펩티도글리칸의 (1, 4) glycosidic bond를 절단하는 역할을 한다.
EDTA(Ethylene Diamine Tetra Acetate)는 Mg 이온을 제거하는 역할을 한다. Mg 이온이 세포벽의 전체 구조를 유지시키는데 필수적이기 때문에 이는 세포벽이 불안정하게 하는 역할을 한다. 또한 DNA 분해효소를 불활성화시키는 기능도 있다.
SDS(Sodium Dodecyl Sulphate)는 세포막의 지질 분자를 제거하는 역할을 한다. 그 외에 CHAPS라는 물질도 이용된다.
이러한 화학처리를 한 후에는 원심분리를 하여 세포 찌꺼기를 모두 제거한다. 지금까지의 과정을 그림으로 나타내면 <그림 1>과 같다.
식물 세포에 대하여 cell lysis를 수행하고 싶다고 하자. 이 경우에는 lysozyme이 더 이상 효과가 없다. 특히 식물의 세포벽의 주성분인 셀룰로오스를 분해해야 하는데, 이를 위해서 셀룰라아제(cellulase : 셀룰로오스 분해효소) 처리를 해 주어야 한다.

참고 자료

없음