ELISA의 특징 및 실험방법 [효소,효소면역,Direct ELISA,Sandwich ELISA]

소개글

ELISA의 특징 및 실험방법 Protocol 및 각 단계에서의 주의할점 대해 서술

목차

1. ELISA란?

2. ELISA의 원리

3. ELISA의 종류
1) Direct ELISA
2) Indirect ELISA
3) Sandwich ELISA

4. 일반적인 ELISA 실험방법

본문내용

Enzyme-Linked Immunosorbent Assay 로 Ag-Ab interaction을 이용하여 Ag or Ab를 정성, 정량할 수 있는 감도가 매우 우수한 실험방법이다.
면역글로불린(immunoglobulin)은 특정효소와 결합할 수 있고, 효소의 작용으로 면역글로불린의 존재를 확인할 수 있는데 이러한 기술을 효소결합 면역흡수 분석법(ELISA) 이라한다. 이 면역학적 검사방법은 항체분자에 효소를 공유결합으로 부착시켜 높은 특이성과 민감도를 가지기 때문에 정성 및 정량분석에 유리하며 임상적으로 널리 쓰이고 있다.(0.001-0.01㎍/ml까지 측정가능) 이 기법은 효소의 촉매작용과 항체의 특이성에 변화를 주지않고 효소를 공유결합시킨 항체를 사용한다
ELISA는 그 방법이 간단하고 비용이 많이 들지 않으며 다량 분석이 가능하여 현재 가장 널리 쓰이고 있는 항원-항체 분석법의 하나가 되고 있다. 특히 이 방법은 방사능면역시헙법 (RIA, Radio ImmunoAssay)고 같이 매우 민감한 반응이면서도 RIA에서처럼 방사능을 사용하지 않는다는 장점이 있어서 그 사용이 증가되고 있는 방법이다.
항체에 결합되는 효소 중에는 간단한 기질 용액을 넣어주면 색깔을 띄는 반응이 이용되는 데, 대표적인 효소로는 염기성인산분해효소 (alkaline phosphatase)나 양고추냉이과산화효소 (HRP, horseradish peroxidase) 등이 많이 이용되고 있다. 이들 효소는 항체분자의 Fc 지역에 공유결합되도록 화학반응을 이용하여 결합시켜 사용한다

참고 자료

P. 및 Roitt i. 1999년을 탐구한다. 면역학의 백과사전. 학업 부담 Inc 의 제 2 ed.,
샌디에고, 미국
분자 생물학에 있는 1994의 현재 프로토콜. 양 2. John Wiley & Sons Inc., 미국