조단백질 정량-킬달법

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최초 등록일: 2009.12.27
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조단백질정량-킬달법; 이론 및 실험방법

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1) 분해

시료 1～5g(질소함량이 10mg 정도)을 정확하게 칭량하여 200mL용의 Kjeldahl flask에 시료가 분해 flask 내벽에 부착되지 않도록 주의하여 넣는다. 그리고 분해촉진제 0.5～1g 과 진한 황산 20mL를 가하여 draft 실이나 Kjeldahl 질소분해장치같은 분해대 중에서 서서히 가열시킨다. 분해가 시작되면 탄소가 유리하여 끈적한 흑색이 되기 때문에 내용물이 넘치지 않도록 주의하여야 한다. 처음에는 약하게 가열하고 거품이 생기지 않으면 강하게 가열하여 분해한다. 반응이 진행됨에 따라 탄소는 탄산가스로 되어 날아가고 분해액은 투명하게 되어 황산구리의 담록색을 띤다. 가열시간은 시료에 따라 다르지만 투명하게 되면서부터 약 1시간동안 가열하면 충분하다. 가열이 끝나고 나면 실온에서 방냉하고 발열에 주의하면서 증류수를 첨가한다. 방냉 후 100mL의 정용 flask에 씻으면서 넣고 다시 방냉하여 표선까지 증류수를 넣어서 100mL로한다.

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