E. coli 에서의 GFP 발현유도

소개글

대장균에서 GFP 발현을 유도하는 실험 노트

기초 gene clonning 부터 확인까지 전부 상세한 자료와 함께 설명되어 있습니다.

목차

 Title
 Purpose
 Introduction
- plasmid
- PCR
- restriction enzyme
- DNA elution
- Ligation
- transformation
- transduction
- conjugation
- SDS-PAGE
 material
 Method
- Plasmid DNA isolation
- PCR
- DNA Elution
- Ligation & Transformation
 result
 reference

본문내용

E. coli 에서의 GFP 발현유도
E. coli 에서의 GFP 발현유도 과정에 해당하는 각 실험에 대해 안다.
- plasmid
․ 기본적 특징
* 세포세포내에서 염색체와는 독립적으로 존재하는 환상의 DNA
* 세균의 항생제에대한 저항성은 세균이 갖고 있는 플라스미드에 기인된다.
(선발표지로 이용된다.)
* 모든 플라스미드는 복제 개시점(origin of replication)이 될 수있는 적어도 한 개의 DNA 염기서열을 갖고 있어 세포내에서 세균의 염색체와 독립적으로 존재한다.
* 작은 플라스미드는 복제시에 염색체의 효소를 이용하지만 큰 플라스미드는 자체에 복제 효소를 가지고 있다.
* 어떤 플라스미드는 세균의 염색체 속으로 플라스미드를 삽입시켜 복제 될 수 있다. --> 통합적플라스미드 또는 episome이라고 한다. (세포가 분열해도 안정적으로 다음으로 유전 된다)--> 박테리오파지 염색체의 중요한 특성
** 크기와 복제 개수(copy number)
플라스미드 1kb - 250kb이상 까지 다양하다.
복제개수란 하나의 세균세포내에 존재하는 각각의 플라스미드 분자수. (적게는 한 개에서부터 50개) -->좋은 클로닝 운반체는 많은 양의 재조합 분자를 얻을 수 있어야한다.
** 접합(conjugation) 및 양립성(compatibility)
플라스미드 -->접합적인것과 비접합적인 것으로 구분된다.

참고 자료

- http://leesy106.com.ne.kr/gonghak/gonghak26.htm
- http://blog.naver.com/mj21204?Redirect=Log&logNo=40030275138
- http://100.naver.com/100.nhn?docid=775411
- http://100.naver.com/100.nhn?docid=709429
- http://blog.naver.com/baw6293157?Redirect=Log&logNo=25605376
- http://www.elpisbio.com/sub/support/protocols/SDS-PAGE-gel.htm
- http://www.fiu.edu/~animals/gel_solutions.html
- http://blog.naver.com/didwns1027?Redirect=Log&logNo=140012497300