Thin-Layer Chromatography(TLC)

소개글

Thin-Layer Chromatography의 원리와 방법

목차

Introduction
Method
●흡착제
●TLC의 전개 방법

본문내용

TLC는 일반적으로 유리판, 알루미늄박, polyester film 등의 위에 흡착제를 얇은 층으로 붙이고 이것을 고정층으로 하여 PC와 같이 용매로 전개하는 chromatography입니다.
TLC의 원리는 다른 column chromatography와 마찬가지로 흡착, 분배, 이온교환 gel 여과 등으로 나눌 수 있겠으나, 주로 흡착 TLC를 이용합니다.

●흡착제
-silica gel, alumina, 규조토, cellulose등이 사용하며 column chromatography용 흡착제에 비해 입자가 매우 가늘답니다.

●TLC의 전개 방법
-시료를 적당한 용매에 녹여 외경 약 1mm의 유리 모세관을 이용해서 박층에 sopt합니다. 일반적으로 한 개의 시료에 대해서 여러 종류의 농도로 spot하여 test를 해본 뒤 실험하는 것이 좋습니다. spot한 시료의 양이 너무 많으면 전개할 때 spot가 너무 크게 되거나 tailing이 일어나서 좋은 결과를 얻기 힘듭니다. 일반적으로 물질의 분리 및 정제를 목적으로 TLC를 사용하는 경우에는 시료를 sopt가 아니라 선상으로 banding하고, 전개후 필요로하는 흡착제를 긁어내어 MeOH나 EtOAc 등 용출력이 강한 용매로 용출시킵니다(PTLC).

TLC의 전개는 위의 그림처럼 전개조를 이용하여 상승법을 행하는 것이 일반적입니다. 이 때, 전개조 안을 용매로 충분히 포화시켜 놓기 위해서 전개조는 완전히 밀폐되어 있는 것이 좋습니다. 전개거리는 보통 10～15cm(저희 실험실에서는 주로 5cm를 사용합니다) 정도이며 전개가 끝나면 용매선던의 위치를 기록하고 나서 용매를 증발시킨 뒤, 전개된 spot를 검출합니다.

참고 자료

없음