미생물-4. 최확수법 MPN most probable number

소개글

미생물 실험중, 최확수법(MPN; most probable number)을 이용해 균의 정량을 측정하는 실험을 바탕으로 작성한 레포트이다

목차

1. 실험 목적 및 원리
2. 재료, 시약, 기구
3. 실험 방법
4. 결과
5. 고찰 및 이해

본문내용

1. 실험 목적 및 원리
최확수법은 수단계의 연속한 동일희석도의 검체를 3개의 lactose broth에 접종하여 대장균군의 존재 여부를 시험하고 그 결과로부터 확률론적인 대장균군의 수치를 산출하여 최확수로 표시하는 방법이다. 최확수란 이론상으로 가장 가능한 수치를 말하며 이 방법은 미생물의 정량 측정을 목적으로 하고 있다. 대장균군은 lactose를 이용하여 가스를 생성하며 듀란관에 가스가 포집된다. 가스 생성이 된 것을 양성(균이 있다), 되지 않은 것을 음성(균이 없다)으로 보아 균의 정량을 책정한다.
2. 재료, 시약, 기구
E.coli., lactose broth 12개, 시험관, peptone water, 듀란관, autoclave, 피펫 등
3. 실험 방법
∞ 희석 및 접종
① lactose broth에 듀란관을 넣는다. 이때 듀란관의 뚫린 쪽이 바닥을 향하게 한다.
② broth의 뚜껑을 닫고, 위아래로 살짝 왔다갔다하여 듀란관 안에 들어있는 기포가 빠지게 한다.
③ Autoclave에 넣고 작동시킨다.
④ 시험관 세 개를 준비하여 peptone water를 9㎖씩 넣는다.
⑤ 첫 번째 시험관에 E.coli.를 1㎖넣고 희석하여 이 시험관 1㎖의 접종량이 0.1㎖가 되게 한다.
⑥ ⑤번 시험관을 vortexing한 뒤 희석하여 1㎖의 접종량이 0.01㎖가 되게 만들고, 같은 방법으로 접종량 의 희석액도 만든다.
⑦ Autoclave의 작동이 완료되면 lactose broth를 적당히 식힌다.

참고 자료

John Garbutt, 『Essentials of Food Microbiology』, Arnold, 1997
박신인, 『식품미생물학 실험서』, 효일, 2004
이갑상, 『미생물학 분자생물학사전』, 대학서림, 1997