일반 생물학 실험_Western blot analysis

소개글

일반 생물학 실험 보고서입니다. Western blot analysis를 주제로 실험하였습니다.

목차

Ⅰ. 서론
Ⅱ. 재료 및 방법
1. Western transfer
1) 준비물
2) 실험방법
2. 면역염색법(Immunostaining)
1) 준비물
2) 실험방법
Ⅲ. 실험 결과
Ⅳ. 결론

본문내용

Ⅰ. 서론
Western blot과 면역염색법(immunostaining)은 여러 단백질의 혼합물로부터 어떤 특정단백질을 찾아내는 기법으로서 찾고자 하는 단백질에 대한 항체를 사용하여 항원-항체 반응을 일으킴으로써 특정단백질의 존재여부를 밝혀낸다. 이는 여러 단백질을 SDS-PAGE 한 후 Coomassie brilliant blue로 염색하여 질량에 따라 전기영동으로 분리된 단백질 band를 확인하거나 nitrocellulose 또는 nylone membrane에 옮긴 후 단백질이 옮겨진 membrane에서 항원-항체 반응을 이용 특정 항체에 대한 항원을 찾아내는 기법으로 본 실험에서는 Western blot과 면역염색법을 이용하여 지난 실험에서 사용했던 단백질 추출물을 분석하고자 한다.
Ⅱ. 재료 및 방법
1. Western transfer
1) 준비물
Transfer 완충용액 (25 mM Tris-Cl, pH 8.3, 1.4% glycine, 20% methanol), TBST 완충용액 (10 mM Tris-Cl, pH 8.0, 150 mM NaCl, 0.05% Tween 20)
2) 실험방법
① 전기영동이 끝난 gel을 약 50 ml의 transfer 용액으로 30분간 평형시킨다.
② Nylon membrane(



Ⅲ. 실험 결과
1 2 3 4 5 6 7 8
5번 샘플에서 가장 많은 액틴 단백질이 관찰 되었으며 8번이 가장 적게 함유하고 있음을 알 수 있다.
Ⅳ. 결론
Actin에 대한 Immunostaining 결과를 보고서 어느 샘플에서 가장 액틴이 많고 적은지를 알 수 있다. 다른 항원에 대한 항체를 사용한다면 다른 단백질이 어느 조직에 가장 많이 분포하고 있는지를 알 수 있을 것이다.

참고 자료

없음