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Plasmid Transformation

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최초 등록일
2010.03.05
최종 저작일
2010.03
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소개글

Plasmid Transformation에 관한 레포트입니다

목차

1. 제한효소란? 우리가 사용하는 vector엔 어떻게 적용될까?
2. 전기영동의 방법 및 원리
3. Gel 상에서 DNA visualization 할 수 있는 방법은?
4. Transformation 및 white/blue selection의 원리

본문내용

DNA는 제한효소에 의해 특정부위를 자를 수 있다. 이것은 nucleotide들이 연결되어 있는 phosphodiester 결합을 끊어내는 것을 의미하는데, 이런 역할을 하는 효소를 nuclease라고 하며 바깥쪽을 자르는가 안쪽을 자르는가에 따라서 각각 exonuclease, endonuclease라고 부른다. Endonuclease의 대표적인 것이 바로 제한효소(restriction enzyme, restriction endonuclease)이며, DNA에 존재하는 특정한 염기서열을 인식하고 인식한 서열부위 또는 그 근처에 존재하는 특정부위를 절단한다. 제한효소는 원래 세균이 자신의 세포 내로 침입해 들어오는 바이러스와 같은 외부 DNA를 제거하기 위한 방어기전으로 가지고 있는 것이며, 자신의 DNA는 절단부위의 염기(adenine, cytosine)를 메칠화시켜서 자신의 제한효소가 자신의 DNA를 자를 수 없게 보호하고 있다. Vector는 일정부위에 제한효소 절단부위가 밀집된 부분이 있어서 이 부분에 제한효소를 이용하여 원하는 유전자를 잘라서 삽입하여 DNA sequencing이나 단백질발현에 이용할 수 있다.

참고 자료

biochemistry.yonsei.ac.kr/biochem_molecular/gene_cloning_18.php
genetics.hannam.ac.kr/lecture/GELab2002/GELAB23-transforamtion.htm
http://kbiotec.kijeon.ac.kr/edu_program/pcr.asp

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