된장속의 미생물 동정

소개글

실험 수업 보고서입니다.

목차

Object
Theory
Sample채취 및 실험 방법
result
conclusion
reference

본문내용

Object
한국의 재래식 장류는 예로부터 계승된 우리나라의 대두 발효 식품으로서, 곡류 단백질에서 부족 되기 쉬운 필수 아미노산 및 지방산, 유기산, 미네랄, 비타민류들의 영양소를 보충해줌으로서 영양학적으로도 중요한 기능을 가진다. 실제 된장을 몸 에 좋은 발효식품이라 많은 발효미생물들이 함유되어 있을 것이라 생각하지만 실제로 어 떤 미생물들이 들어 있는지는 분리 동정 하여 본다.
분리에는 각 균별로 일반정인 영양요구를 감안하여 각각의 영양교구에 최적화된 배지를 사용하며 일반세균, 곰팡이, 젖산균의 분리 배지를 사용하여 각각의 균들을 분리하며 동정의 할 경우는 일반적인 형태학적인 관찰을 토대로 분리 할 수 있을 것이다．
Theory
1. 미생물의 배양
자연적인 서식처에서 미생물은 대개 여러 종류의 생물종이 섞인 복잡한 혼합집단에서 자란다. 혼합배양 상태에서는 한 종의 미생물을 적절하게 연구할 수 없다. 따라서 개별 종의 특성을 연구하려면 단일세포에서 자라난 세포의 집단을 순수배양 하여야 한다. 독일 세균학자 코흐가 개발한 순수 배양기법은 미생물학이 지평을 바꾸었다. 순수배양 기술이 사용된 지 20년 만에 사람에게 세균성 질환을 유발하는 대부분의 병원균이 분리되었다. 순수배양에는 여러 가지 방법이 있으면 여기서는 가장 일반적인 방법만을 살펴보기로 한다. 세포의 혼합약을 한천 표면에 잘 도말하면 각 세표가 자라서 완전하게 분리된 집락을 형성한다. 집락(colony)이란 고체 표면에 자라서 육안으로 볼 수 있는 미생물의 군집으로 각각의 집락은 하나의 세포가 순수 배양되어 형성된다. 획선평판법(streak plate)으로 순수배양을 할 수 있다. 여러 미생물이 섞여 있는 혼합물을 백금이나 면봉을 이용해 한천배지의 한쪽 끝에 접종한 다음 여러 형태를 그리면서 표면 전체로 획선을 긋는다. 이 과정 중에 어떤 지점에 이르면 백금에서 단일세포가 떨어져 나와 한천 표면에 묻게 되고 이것이 자라 분리된 집락을 형성한다. 단일세포가 공간적으로 얼마나 떨어져서 자라는가에 따라 순수배양의 성공여부가 결정된다.
2. 현미경 관찰
광학현미경으로 살아 있는 미생물을 직접 관찰할 수도 있다. 그러나 시료를 고정시킨 다음 염색하면 관찰이 더 쉽고 형태적인 특징을 잘 살릴 수 있으며 장기 보관이 가능하다. 염색하여 현미경으로 관찰하는 세포는 살아 있는 세포와 가능한 비슷해야 한다. 고정(fixation)이란 세포나 미생물을 내무 및 외부 구조가 보존된 채로 슬라이드에 부착시키는 과정이다. 시료를 고정하면 세포의 형태를 파괴하는 효소가 비활성화 되고 세포구조가 단단해져 염색과 관찰과정에서 변형되지 않는다. 고정하는 동안 미생물은 모두 죽은 채로 현미경 슬라이드에 단단하게 부착된다. 기본적인 고정방법으로 다음의 두 가지가 있다.
(1). 세균을 슬라이드에 얇게 도말하여 공기 중에서 건조시킨 다음 열처리하여 고정한다. 이 방법은 전체적인 형태는 그대로 유지하나 세포의 내부구조는 유지하지 못한다.

참고 자료

http://www.thelabrat.com/restriction/sources/Bacilluslicheniformis.shtml
http://blog.naver.com/aliceayres/120035940879
유승구,조원희.1999.전통 된장 및 간장의 숙성기간별 생육 미생물의 분리 및 동정.
김진욱 외5명, 2005.6.9, Bacillus licheniformis의 생균제로서의 특성.
Prescott,Harley,klein.5/e.Microbiology. p.481~486, p.497~498
http://society.kisti.re.kr/index.jsp