Mini-preparation of plasmid DNA 추출

소개글

Plasmid DNA 추출 결과 실험 레포트 입니다.
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목차

Mini-preparation of plasmid DNA 추출
실험방법
실험결과

본문내용

1. O/N시킨 bacteria 3㎖를 eppi-tube에 넣어주고, 30초 동안 centrifuge 한다.
▷ 더 많은 DNA를 추출하기 위해 2번 반복했다.

2. 240㎕ TEG용액(solution 1)을 넣고 vortexing하여 섞어준다.
▷ 최강으로 vortexing해 준다.

3. 480㎕ NaOH/SDS(0.2M/1% : solution 2)를 더하고 tube를 뒤집기를 반복하여 부드럽게 잘 섞어준다.
▷ NaOH/SDS은 세포벽에 구명을 만들어줘서 plasmid가 나오는 통로를 만들어 준다.
▷ 최고 약하게 섞어주는 이유는 cell wall이 느슨해져 있어 세포가 터질 수 있기 때문 이다.

4. 360㎕ KOAc(3M : solution 3)를 넣고 tube를 거꾸로 하여 vortexing 한다.
▷ tube를 거꾸로 하고 vortexing하는 것은 약간 부드럽게 섞어주는 방법이다.

5. 얼음에 5분간 둔다.

6. centrifugation(10분/4℃)한 후, 윗 용액에서 900㎕를 새로운 tube로 옮긴다.

7. 540㎕ propanol(4℃)을 넣고 centrifugation(15분/4℃)한다.

참고 자료

없음