효소의 특성에 관한 실험

소개글

효소의 특성에 관한 실험 후 결과 레포트 (대학교 1학년 수준)

목차

1. 실험 목적
2. 실험 재료
3. 실험 방법
3. 실험 결과
4. 논의

본문내용

1. 실험 목적

1) amylase의 작용이 온도와 salt 조건, pH 조건에 따라 어떤 영향을 받는지 조사하고, 최적 조건을 찾을 수 있다.
2) 효소의 특성에 대해 이해할 수 있다.


2. 실험 재료

α-amylase (from Bacillus amyloiquefaciens), 1% starch 용액, 0.1N Iodine 용액,
pH 3.0, 7.0, 10.0 TE buffer (Tris-EDTA buffer), D.W, 5%, 10%, 20% NaCl 용액,
40℃, 70℃항온수조(water bath), 시험관, 시험관대, 파이펫, 얼음, 온도계


3. 실험 방법

1) 효소의 작용에 미치는 온도의 영향

(1) 6개의 시험관에 ①~⑥까지 labeling 하였다.
(2) 각 시험관에 2㎖의 녹말용액, TE buffer(pH 7.0) 1㎖, D.W 1㎖을 넣었다.
(3) ①②번 시험관은 4℃(얼음), ③④번 시험관은 40℃ water bath,
⑤⑥번 시험관은 70℃ water bath에서 5분간 pre-warming하였다.
(4) 요오드를 20㎕씩 넣었다.
(5) ②④⑥번 시험관에 각 40㎕의 α-amylase을 가하여 잘 섞고. 해당 온도에 놓아두었다.
(6) 각 온도에서 10분간 incubation시킨 후, 요오드를 20㎕ 다시 넣고 각 조건에 따른 발색반응의 변화를 통해 효소의 활성을 추정하였다.


2) 효소의 작용에 미치는 salt의 영향

(1) 시험관에 ①~⑧까지 labeling하였다.
(2) 2㎖의 녹말용액, TE buffer pH7.0 용액 1㎖을 각각 넣고 잘 섞어주었다.
(3) ①~⑧ 시험관에 D.W, 5%, 10%, 20% NaCl 1㎖를 순서대로 2set 넣고 잘 섞어주었다.
(4) 70℃ water bath에 5분간 pre-warming시킨 후, 요오드를 20㎕를 넣고, ①~④ 시험관에 α-amylase 40㎕를 가하여 잘 섞었다.
(5) 70℃ water bath에 10분간 incubation시킨 후, 요오드를 20㎕ 다시 넣고 각 조건에 따른 발색반응의 변화를 통해 효소의 활성을 추정하였다.

참고 자료

1) 서울대학교 생명과학부 ‘효소의 특성’ 핸드아웃
2) 구글 검색 www.google.co.kr
3) Campbell, `생명과학`, 바이오사이언스, 2008