PCR (Polymerase Chain Reaction)

소개글

PCR은 특정 DNA부위를 특이적으로 반복 합성하여 시험관 내에서 원하는 염기서열을 증폭시키는 방법으로, 아주 적은 양의 DNA를 이용하여 많은 양의 DNA합성이 가능하다.
이번 실험에서는 당근의 열충격 단백질을 coding하는 유전자인 DcHSP17.7을 사용하여 PCR을 실시하였다. PCR을 준비하는 과정에서 각 조별로 상보적인 Primer를 넣는 조와 비상보적인 Primer를 넣는 조, 여러 시약들이 미리 섞여진 Premix를 넣는 조와 각각의 시약을 따로따로 넣는 조 로 실험조건을 달리하여 각각의 요소들이 PCR결과에 어떠한 영향을 미치는지 알아보고자 하였다.

목차

1. Abstract
2. Introduction
3. Material & Method
4. Results

본문내용

1. Abstract
PCR은 특정 DNA부위를 특이적으로 반복 합성하여 시험관 내에서 원하는 염기서열을 증폭시키는 방법으로, 아주 적은 양의 DNA를 이용하여 많은 양의 DNA합성이 가능하다.
이번 실험에서는 당근의 열충격 단백질을 coding하는 유전자인 DcHSP17.7을 사용하여 PCR을 실시하였다. PCR을 준비하는 과정에서 각 조별로 상보적인 Primer를 넣는 조와 비상보적인 Primer를 넣는 조, 여러 시약들이 미리 섞여진 Premix를 넣는 조와 각각의 시약을 따로따로 넣는 조 로 실험조건을 달리하여 각각의 요소들이 PCR결과에 어떠한 영향을 미치는지 알아보고자 하였다.
PCR은 각각의 단계에서 적정온도를 유지하며 30Cycle을 실시했고, 그 결과 비상보적 Primer를 사용한 1조와 2조의 전기영동 결과에서 Band를 찾아볼 수 없었다. 이는 Primer가 Template과 결합하지 못하여 Gene의 증폭이 일어나지 않은 결과라고 볼 수 있다.
Premix를 사용한 조와 그렇지 않은 조의 결과에서는 뚜렷한 차이를 볼 수 없었으며, 상보적 Primer를 사용한 조의 결과에서는 모두 400~500bp 사이의 Band를 확인함으로서 최초 사용했던 Template DNA가 증폭된 것을 확인할 수 있었다.


2. Introduction
-중합효소연쇄 반응 (PCR)
중합효소연쇄반응이란 생물학적 클로닝에 의존하지 않고 시험관 내에서 선택적으로 DNA 염기서열을 증폭 할 수 있는 방법이다. PCR은 몇 시간 내에 특정한 염기서열에 대한 수 백만개의 복제본을 합성할 수 있도록 해준다. 이 방법은 심지어 대상 염기서열이 전체의 초기 시료 백만개 중 한 부분에 지나지 않을지라도 그 서열의 증폭을 가능하게 한다. PCR은 세균, 바이러스, 식물, 또는 동물이든 그 원천에 관계없이 DNA 서열을 증폭시키는데 사용할 수 있다.

A. PCR의 과정들
PCR에서는 DNA의 표적 부위를 반복적으로 증폭하기 위하여 DNA 중합효소를 사용한다.

참고 자료

없음