임상화학

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임상화학 레포트

목차

1. 인지질(Phospholipid) 측정법을 분류하고 설명하라.
2. 유리지방산(Free fatty acids)의 개요 및 임상적의의
3. 지질단백의 전기영동분획을 그림으로 그리고 명칭 및 그 분획의 성분.

본문내용

1. 인지질(Phospholipid) 측정법을 분류하고 설명하라.

-측정법 분류
1) 무기인화 하는 방법
(1)유기용매 추출법
(2)TCA 침전법
①인지질의 추출, 분리
②회화(무기인화)
③무기인의 정량과정을 가지며 종래 Folch의 추출액에 의해서 ②③을 하는 방법이 일반적으로 사용되지만 인지질을 함유하는 단백침전에 의해서②③을 하는 간단한 방법도 고안되고 있다.
회화조작은 과염소산을 이용해서 고온가열조에서 실시하면 능률적이다. 인의 정량은 혈청 무기인의 정량법과 같으며 molybden blue로써 비색하는 방법이 이용되고 환원제로써 황산히드라존이 감도가 좋고 발색이 안정하다. 즉 추출, 용매제거, 회화, 발색, 비색과정을 거친다.

2) 효소법
①Phospholipase C법: 생성된 phosphorycholine에 ALP을 작용시켜 인산과 코린으로 만든다. 여기서 생긴 무기인을 측정한다.
②Phospholipase D법: 가수분해에서 생성된 코린의 양을 choline oxidase를 이용해서 H2O2와 betaine이 생성되며 이 H2O2를 POD/4-AA/페놀 공역반응에서 정량한다. 이 방법이 가장 많이 이용되고 있다. PL-D는 리소레시틴에 특이성이 낮고 결과적으로 회화적인 측정법보다 약 10% 낮으며 PL-D는 코린을 생성하지 않는 것도 있으므로 몇 %정도 낮다.

-측정법 설명
1) 유기용매 추출법, Baginski법
<원리>
알콜에틸로 인지질을 추출하고 단백을 침전시켜 분리한 추출액을 건조시켜 칼슘이 소량들은 질산으로 처리한다. 칼슘은 회화과정에서 P의 소실을 막고 pyrophosphate 생성을 막아준다. 건조시킨 유기잔사는 질산을 완전히 증발시켜 버림에 의해 파괴된다. 이것을 TCA-ascorbic acid혼합액으로 녹이고 molybdite, arsenite 를 가하면 청색()이 발현된다. 과량의 molybdate는 citrate와 결합해서 혼탁을 막아준다.
<시약>
① Phosphate stock std.: KH2PO4 를 100℃에 건조시킨 것을 438.1mg 달아 100ml에 녹인다. (1mgP/ml, 28m mol p/L)
② 사용표준액: 5ml의 stock을 물 100ml에 녹인다.(0.05mgP/ml, 1.4m moleP/L)

참고 자료

없음