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spectrocopy

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최초 등록일
2010.10.15
최종 저작일
2010.10
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소개글

spectrocopy

목차

Propose
Materials
Method
Results and Discussion
첫 번째 실험
A(흡광도)
두 번째 실험
세 번째 실험
Reference

본문내용

Propose
Spectroscopy를 조사하여 Absorbance, Transmittance and Beer-Lambert law의 관계에 대해 이해하고 그 의미를 파악하여 보자.

Materials
Bradford reagent, EP tube, spectroscopy, BSA, cuvette

Method
1. Bradford reagent 1ml 7개를 EP tube에 만든다
2. 위 1의 EP tube 중 하나로 spectroscopy의 0점을 맞춘다.
3. 1 mg/ml BSA 2ul를 위 1의 EP tube에 넣고 1min 동안 천천히 up and down 한다.
4. 그 다음 1 min 동안 spectroscopy의 detector 안에 넣어 둔다.
5. 595 nm에서 흡광도를 측정한다.
6. 4 ul, 6 ul, 8 ul, 10 ul 도 같은 방법으로 시행하고 standard curve를 그린다.
7. 미지의 시료를 2 ul 넣고, 같은 방법으로 측정한 후 농도를 구한다.

BSA 용액에 따른 흡광도를 젠 결과 위의 표의 값이 나왔다.
흡광도의 값이 생각보다 높게 나왔다. 그 이유를 곰곰이 생각해본 결과 너무 오랜 시간 후에 spectrophotometer 를 해서 OD값이 높게 나온 것으로 생각된다.
위의 수치를 Excel에 대입하여 추세선을 얻을 수 있다.

위의 그래프를 통해 y = 0.0517x + 0.0234 라는 추세선의 값을 얻을 수 있다.
우리가 아는 값이 미지시료 2ul 를 넣었을 때의 흡광도가 0.489nm 라는 것이고,
구하고자 하는 값이 미지시료 2ul 안에 들어있는 x의 농도이다.
따라서 0.489 = 0.0571 * X + 0.0234 라는 관계식이 나온다.
이것을 풀어보면 X = 8.1541 값이 나오게된다.
따라서 미지시료 2ul안에 들어있는 x의 농도는 8.1541 ug/ul 이다.

참고 자료

http://www.google.co.kr/imglanding?q=%EB%B3%B4%EC%83%89%EA%B4%80%EA%B3%84&imgurl=http://www.anitharmnone.com/images/colorwheel.jpg&imgrefurl=http://cafe.chosun.com/club.menu.bbs.print.screen%3Fp_club_id%3Ddreamview%26p_menu_id%3D19%26message_id%3D526450&usg=__vCy9DlQ_fG7gSmWiGC7qiKzivY0=&h=335&w=337&sz=114&hl=ko&zoom=1&tbnid=yCPkAoJ5mcU2nM:&tbnh=118&tbnw=119&prev=/images%3Fq%3D%25EB%25B3%25B4%25EC%2583%2589%25EA%25B4%2580%25EA%25B3%2584%26um%3D1%26hl%3Dko%26lr%3D%26newwindow%3D1%26sa%3DN%26tbs%3Disch:1&um=1&itbs=1&um=1&lr=&newwindow=1&sa=N&tbs=isch:1&start=0#tbnid=yCPkAoJ5mcU2nM&start=1
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