세포생물학실험-Digestion of DNA, Electrophoresis of DNA-2

소개글

세포생물학 실험 레포트입니다.

목차

1.Introduction
2. Material
3. Method
4. Result
5. Discussion
*Reference

본문내용

1.Introduction
-1. Digestion of DNA란
DNA를 자른다는 것은 nucleotide들이 연결되어 있는 phosphodiester 결합을 끊어내는 것을 의미하는데, 이런 역할을 하는 효소를 nuclease라고 하며 바깥쪽을 자르는가 안쪽을 자르는가에 따라서 각각 exonuclease, endonuclease라고 부른다. Endonuclease의 대표적인 것이 바로 제한효소(restriction enzyme, restriction endonuclease)이며, DNA에 존재하는 특정한 염기서열을 인식하고 인식한 서열부위 또는 그 근처에 존재하는 특정부위를 절단한다. 제한효소는 원래 세균이 자신의 세포 내로 침입해 들어오는 바이러스와 같은 외부 DNA를 제거하기 위한 방어기전으로 가지고 있는 것이며, 자신의 DNA는 절단부위의 염기(adenine, cytosine)를 methylation시켜서 자신의 제한효소가 자신의 DNA를 자를 수 없게 보호하고 있다.

-2. 제한효소를 이용한 Digestion
대부분의 박테리아에서 발견되는 제한효소는 외래 생물체의 DNA를 인식하고 분해한다. 박테리아는 수 백만년 동안 외래 DNA의 침입에 직면해 왔으며, 침투한 DNA를 파괴하는 동안 자신의 DNA를 보존하는 보호 메카니즘으로써 이들 효소들을 발전시켜 왔다. 각 제한효소는 일반적으로 4~5 염기쌍 정도의 짧은 염기서열만을 인식한다. 예를 들어 최초의 분리된 제한효소중 하나의 EcoRI은 오직 다음 염기서열을 가진 DNA만을 전달한다. 이 경우 표적 염기서열은 앞쪽과 뒤쪽으로 똑같이 읽혀지기 때문에 팔린드롬 구조(또는 회문성구조)라 불린다. 간단히 언급하면 많은 제한효소는 회문성 구조의 표적서열을 인식한다. 만일 이 서열이 침입한 원형의 플라스미드에 하나 존재한다면 효소는 그곳을 한번 절단하여 원형을 푼다. 만약 이 서열이 여러 부위에 있다면 DNA는 여러 조각으로 절단되게 된다.
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참고 자료

분자생물학/심웅섭외 6명/월드사이언스/1999/P382~P383
http://biochemistry.yonsei.ac.kr/zboard/bbs/zboard.php

1. 유전자감식/DNA프로필연구회/탐구당/2001/p28~30
2. 유전자클로닝입문 제 4판/강종백 외3인/ 월드사이언스/ 2003/ p72~73
3. 전기영동 최신 프로토콜/ 강호일/ 월드사이언스/ 2006/p14~21