단백질 측정방법(PCR법의 조사)
- 최초 등록일
- 2010.12.07
- 최종 저작일
- 2009.01
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소개글
PCR법의 조사,단백질 측정방법에 관련한 레포트 입니다.
목차
PCR법 [polymerase chain reaction]
단백질 함량 측정방법
본문내용
PCR법 [polymerase chain reaction]
PCR법은 DNA가 아주 적은 양이더라도, 우리가 원하는 부분을 엄청난 양과 높은 정확도로 크게 늘릴 수 있다. 또한 장비가 단순하여 현재는 책상 위에 놓을 수 있는 장비로도 간단히 사용할 수 있으며 증폭에 걸리는 시간 역시 2시간 정도로 짧다는 장점을 가지고 있어서, 현대 생물학의 모든 분야에서 가장 중요한 기반 기술로 이용되고 있다. 현대 생물학에서 없어서는 안 될 가장 중요한 기술에 속한다.
원리
증폭시키려 하는 주형(template) DNA와 함께 우리가 증폭시키고자 하는 특정 지역에 결합하는 프라이머(primer)와 DNA 중합효소(DNA polymerase), 새로운 DNA를 만들기 위한 재료인 dNTP(Deoxynucleotide triphosphate)를 함께 집어 넣어 준다. 이제 94~96도 정도로 열을 가하면 한 개의 DNA가 두 가닥으로 분리(denaturation)된다. 이후 온도를 50~64도 정도로 내리면 프라이머와 중합효소가 외가닥 DNA의 특정 부위에 결합(annealing)하고, 다음에 합성(elongation)되어 2개의 DNA가 된다. 이것이 1주기가 되며 다시 온도를 올려서 이 과정을 반복하면, 4개, 8개, 16개가 되는 식으로 폭발적인 연쇄 작용을 통해 원하는 DNA의 양이 늘어나게 된다. 여기서 프라이머란 DNA 중합효소가 붙어서 DNA 합성을 개시할 수 있는 15~50 염기쌍(base pair) 정도의 올리고뉴클레오타이드(oligonucleotide)를 말한다.
DNA 중합효소는 말 그대로 DNA를 합성할 수 있는 효소로서, 개발 초기에는 대장균의 DNA 중합효소를 사용했다. 하지만 고온, 저온을 왕복하는 과정 때문에 고온에서 DNA 중합효소가 변형되어, 매번 새로 넣어 줘야 하는 불편
참고 자료
없음