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[결과]PCR & Agarose gel 전기영동

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PCR

Agarose gel 전기영동
1. 실험일시 :2010년 3월 26일, 4월 2일
2. 실험제목 : PCR & Agarose gel 전기영동
3. Result
① PCR
PCR의 경우에는 지난주에 조의 조원들이 각각 colony와 준비된 시약을 넣고 PCR한 뒤, 그 결과를 가지고 이번 주에 전기영동 시켜보았다. 실험결과 한 개의 밴드가 잘 나타났으나 끌림 현상을 보였다.
② Agarose gel 전기영동
전기영동 실험에서는 DNA를 제한효소 처리한 후에 전기영동을 시켰다. 두 종류의 효소를 가지고 첫 번째 DNA에는 효소1을, 두 번째 DNA에는 효소2를, 세 번째 DNA에는 효소 1과 2를 동시에 처리했다. 그 결과 첫 번째에서는 한 개의 띠가 나타났고 세 번째에선 두 개의 띠가 나타났으나 두 번째에서는 아무것도 나타나지 않았다.
4. Discussion
① PCR
PCR실험은 4주차에 한 실험으로 PCR방법으로 적은양의 DNA를 대량으로 증폭해보고 5주차에 전기영동해보고 그 결과를 관찰해보았다. template에 따라서 PCR의 종류가 달라지는데 우리가 이번에 한 PCR은 colony PCR로 지난번에 우리가 배양했던 colony에서 따온 것이었다. 볼륨을 맞추기 위해 물을 넣어주는데, 우리 조는 실수로 물을 많이 넣어버렸지만 결과엔 아무런 이상이 없었다. 결과를 살펴보면 한 개의 밴드가 나타났으나 끌림 현상을 보였다. 끌림 현상의 원인을 생각해보면, PCR실험할 때 DNA를 증폭하면서 원하는 가닥을 얻어내고 남은 원래가닥이나, 제대로 annealing을 끝내지 못한 가닥들이 BP가 많아 끌림 현상을 유도한 것 같다. 또는 PCR주기가 좀 빨라서 완전히 형성을 못했기 때문에 일어난 것일 수도 있다.
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