[분석화학실험]Determination of Caffeine in HPLC

소개글

HPLC를 이용하여 카페인을 정성분석하여 보는 매우 간단한 실험입니다.
HPLC의 원리 및 사용법에 대해서만 알고 있다면 카페인에 양적인 계산이 쉽게 해결되는 분석화학실험입니다.

목차

■ 실험 목적
■ 실험 이론 및 원리
• 고성능(압력) 액체크로마토그래피(High Performance(Pressrure) Liquid Chromatography)
• HPLC의 구성 및 원리
• 액체 크로마토그래피의 이동상
• 액체 크로마토그래피의 시료주입장치와 컬럼
• 액체 크로마토그래피의 검출기
■ 실험 기구 및 시약
■ 실험 방법
■ 실험 결과
■ 토의 사항
■ 참고 문헌

본문내용

HPLC(High performance liquid chromatography) 를 이용하여 미지시료에서 caffeine의 농도를 결정하기 위한 실험을 진행한다. 보통 caffeine 분석은 추출 후 분광광도법을 이용하지만 HPLC를 이용하여 혼합물중의 포함되어 있는 caffeine을 보다 손쉽고 빠르게 분석할 수 있다.
Retention Time(Tr) 을 사용하여 정성 분석이 가능하고 peak의 높이나 면적을 측정하여 정량분석이 가능하다.
실험 이론 및 원리
고성능(압력) 액체크로마토그래피(High Performance(Pressrure) Liquid Chromatography)
화합물 중에는 충분히 휘발하지 못하는 물질이나 컬럼을 통과할 수 없는 물질, 그리고 물질이 분리조건하에서 열적으로 불안정하거나 열적 분해를 일으키는 물질이 많기 때문에 기체 크로마토그래피에 의한 분리는 약 20%에 지나지 않는다. 고성능 액체 크로마토그래피는 시료의 휘발성이나 열적 안정성에 제한받지 않고, 거대분자와 이온화학종, 불안정한 천연물질 고분자물질과 다른 큰 분자량을 가지는 다중 작용기의 다양한 화합물을 분리할 수 있다. 액체 크로마토그래피에서의 분리는 기체 크로마토그래피 이동상에서는 본질적으로 존재하지 않는 시료분자와 정지상 및 이동상 간에 독특한 상호작용에 의존한다. 액체 크로마토그래피는 정지상을 더욱 다양하게 제공함으로써 이들의 선택적 상호작용에 큰 다양성을 주어 분리 가능성을 더 높여 준 것이다.
HPLC의 구성 및 원리
HPLC는 일반적으로 500～5000psi의 압력으로 일정하게 이동성 용매를 흘려주는 펌프를 이용한다. 중력 액체 크로마토그래피에 비해 HPLC의 가장 명백한 이점은 시료가 더욱 신속하게 분리된다는 점이며. 시료를 신속하게 일괄적으로 분리시킬 수 있다는 점이다. 그래서 혼합된 시료 성분이 분리관(column)의 고정상(stationary phase)과 이동상(mobile phase)을 통하여 흐르면서 시료가 고정상과 이동상에 흡착작용(adsorption), 분해작용(partition), 이온교환작용(ion exchange), 분자작용

참고 자료

기기를 이용하는 화학실험법, Donald T. Sawyer/ William R. Heineman/ Janice M. Beebe, 박기채/박면용/원충택/차기원
기체, 액체 크로마토그래피 및 질량 분석학, 김택제, 명승운, 조현우, 자유아카데미, 2007
품분석법, 채수규 외 3명, 지구문화사
기기분석의 원리와 응용, 박면용 외, 녹문당,