실험배지제조, Plasmid DNA isolation and purification, Agarose gel electrophoresis 실험

소개글

생물공학과, 화학공학과에서 설험하는
실험배지제조, Plasmid DNA isolation and purification, Agarose gel electrophoresis 실험에 대한
목적, 방법, 이론, 결과 등 자세히 정리하였습니다.

목차

1. 실험목적
2. 실험이론
3. 기기 및 기구
4. 재료 및 시약
5. 실험 과정

본문내용

실험 배지제조
1. 실험목적
세포의 선택 및 대량 배량에 필요한 배지를 제조한다.
2. 실험이론
특정 미생물을 키우기 위해서는 그 미생물에 맞는 영양분이 들어 있는 배지를 만들어야 한다. 일반적으로 배지는 상태에 따라서 고체배지와 액체 배지로 나누며, 그 필요한 영양소가 많은가 적은가에 따라서 최소배지와 rich media로 나눈다. 그리고 그 배지를 만드는 제조방법에 따라서 천연배지와 합성배지, 혼합배지로 나눈다.
고체배지는 주로 특정 미생물의 순수분리 혹은 보관을 하는데 주로 사용한다. 가령 어떤 항생물질에 저항성이 있는 세포를 선택하고자 할 때 고체배지에 그 항생물질을 첨가한 후 세포를 키우면 그 항생제에 저항성이 있는 세포는 군집을 형성하는 반면, 그렇지 않은 세포는 죽게 된다. 또는 어떤 유전자의 돌연변이가 생긴 세포를 골라낼 때도 사용한다. 액체배지는 고체배지에서 선택된 미생물을 대량으로 키울 때 주로 사용한다. 고치배지는 세포가 군집을 형성할 수 있는 범위가 한정이 되어 있지만, 액체 배지의 경우는 배지의 양만큼 세포를 많이 얻을 수 있다. 따라서 일반적인 실험에서는 고체배지로 특정 미생물의 군집을 키운 후 그 군집을 하나 취해서 액체배지로 대량 증식시킨다. 고체배지는 액체배지와 그 영양소의 구성 요소는 같지만 단지 agar 혹은 젤라틴을 첨가함으로써 만들 수 있다.
위의 배지들은 사용할 때 농축된 배지를 멸균 증류수로 1X로 희석하고 다음의 용액을 첨가한다. 1㎖ 1M MgSO4·7H2O, 10㎖ 20% 탄소원(당 또는 글리세롤) - 1리터 기준
만약에 필요할 경우에는
0.1㎖ 0.5% 비타민 B1 (티아민), 20% Casamino Acids 또는 40㎍/㎖ L 아미노산 또는 80㎍/㎖ DL 아미노산 5㎖, 필요한 항생제
등을 첨가하여 배지를 만든다.
최소배지는 주로 특정 성질을 가지는 세포를 선택적으로 키울 때 사용한다. 최소한의 영양소를 공급하기 때문에 세포의 성장속도 또한 느리게 되고, 더 많은 영양소를 필요로 하는 세포

참고 자료

· http://ko.wikipedia.org/ 참고자료 > 백과사전 > 위키피디아
· 디스플레이 화학공학 실험
· 수업시간 필기 자료