competent cell 제조

*덕*

최초 등록일: 2002.09.22
최종 저작일: 2002.09; 5페이지/ MS 워드; 가격 1,000원

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분자 생물학 실험의 기분 재료인 DNA는 많은 양을 확보함으로써 제한효소 처리, sequencing 반응 등 다양한 실험을 수행할 수 있다. DNA를 확보할 수 있는 방법으로는 E.coli에 plasmid DNA 혹은 M13 phage DNA등을 transformation 또는 transgection시켜서 transformant를 증식시킴으로써 그 내부의 DNA를 증폭시킨 후 분리하거나,PCR기술을 이용하여 in vitrㅐ에서 증폭시키는 방법이 있다
처음 단계인 멸균된 LB 배지 3ml에 E.coli cell을 접종하여 overnight 시키는데. overnight으로 preculture 한 것을 1/100 부피로 배양하는데 보통 2시간 정도 키우면 OD 값이 0.5 ~ 0.6을 나타내는 cell density가 되지만 너무 오래 키울 경우 건강하지 않은 E.coli가 많아지게 되기 때문에 주의하면서 실험하였다. 5번 과정까지는 조교님이 미리 준비해 주셨으므로 6,7번 과정만을 수 행 해서 빠른 시간에 실험을 마무리 할 수 있었다

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