아미노산과 단백질 정량, 정성

소개글

아미노산과 단백질을 간단히 소개하고 정성정량 분석방법들을 기술했다.

목차
[3]아미노산과 단백질의 정성․정량분석
(1)닌히드린 시험
(2)Kjeldahl법에 의한 단백질의 정량
(3)뷰렛반응에 의한 단백질의 정량
(4)Lowry법에 의한 단백질의 정량
(5)자외선 분광광도법에 의한 단백질의 정량
(6)Bradford법에 의한 단백질 정량

목차

없음

본문내용

a. N-말단 결정법

·다이니트로페닐(DNP)화법(Sanger법): 펩타이드 또는 단백질을 1-플루오르-2, 4-다이니트로벤진(FDNB)와 pH 8 전후 실온에서 2∼3시간 혼합 N-말단의 아미노기를 DNP-아미노산(황색) 및 그외 다른 유리아미노산의 혼합물이 된다. DNP-아미노산을 여과지 또는 박층크로마토그래피로서 분리 동정시켜 1% NaHCO3에서 용출 360nm의 흡광도를 측정해서 정량을 한다.
·페닐아이소싸이오시아나아트법(PTC법 Edman법): 펩타이드 또는 단백질을 페닐아이소싸이오시아네이트와 피리딘을 함유하는 다이메알릴아민 완충액으로 반응시켜 N-말단 아미노산 잔기를 페닐싸이오카르바밀(PTC) 유도체로 한다. 그 다음 1M-HCl 중에서 가열하고 보면 N-말단아미노산이 3-페닐-2싸이오비탄토일(PTH) 아미노산으로 유리한다. 1M-HCl를 대신하여 트라이플루오르착산을 사용, 가수분해하면 N-말단 아미노산의 티아조리논 유도체가 유리되어 나머지의 펩타이드는 그냥 그대로 보존이 된다.

참고 자료

킴볼생물학/ John W. Kimball/ 탐구당/ 1996/ p.71~84
․생물학-생명의 과학/ 로버트 A. 월리스/ 을유문화사/ 1993/ p.81~90
․실험생화학/ 한국생화학회/ 탐구당/ 1997/ p.197~206
․기초생화학/ Larry G. Scheve/ 교문사/ 1993/ p.25~36
아미노산 및 단백질(Amino acid and protein)