Bradford법을 이용한 단백질 정량분석

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화공기초 실험및 설계 - Bradford법을 이용한 단백질 정량분석 실험 Pre-Post Report

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4. Theory

⇨ 단백질은 유전자의 발현을 통해 만들어지는 것으로서, 그 종류와 기능은 매우 다양하다. 인간의 염기서열을 모두 안다고 해서 그 산물인 단백질을 모두 이해할 수는 없는데, 전사, 해독되는 동안 발현이 조절된다고 하더라도 최종적으로 세포 내에서 기능을 하는지, 한다면 어떤 기능인지는 단백질 합성 후 얼마나 정교하고 적절하게 변형되는가에 달려있기 때문이다. 그래서 생명체의 전체 유전자인 게놈에 의해 발현되는 모든 단백질의 총합인 proteome을 다루고 이들을 대량으로 분석하고 상호기능관계 지도를 작성하며, 구조분석을 통해 궁극적으로 특정 단백질과 이를 만드는 유전자의 기능을 동시에 밝혀내는 proteomics(단백질체학) 분야의 연구가 활발히 진행되고 있다.

생명체로부터 단백질을 정량하여 분석하는 것이 단백질체학의 기초가 되므로, 이번 실험에서는 여러 가지 단백질 정량 방법 중 하나를 수행해볼 것이다. 단백질을 정량하는 방법에는 4가지의 분광학적 방법이 이용된다. 이들은 단백질의 자외선흡수에 따라 그 양을 알아볼 수 있는 것으로 Bradford assay, the Lowry assay, the Smith copper/bichinchoninic assay 네 가지 방법이 주로 이용되는데, 여기서는 Bradford assay에 대하여 알아보기로 한다. 이 정량법은 Bradford dye assay라고도 불리며, 산성용액에서 Coomassie Brilliant Blue 염료는 단백질과 결합하게 되고, 이로 인해 염료의 최대흡광도는 465nm에서 595nm로 이동하게 된다.

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