제한효소 지도 분석

소개글

제한효소를 이용한 DNA 지도 분석 실험의 보고서.
논문 형식을 취함으로써 전문성을 극대화.

목차

1. 서론

2. 원리
2.1. 제한효소
2.2. 제한효소의 이용
2.3. 제한효소 지도 분석

3. 재료 및 시약

4. 실험 방법
4.1. Plasmid 절단
4.2. 0.8X agarose gel electrophoresis

5. 결과
5.1. 1차 실험
5.2. 2차 실험

6. 결론
6.1. 결과분석
(1) DNA size-marker의 이동거리에 따른 분자량
(2) 표준 그래프의 결정
(3) 제한효소 절단부위 판단
(4) Restriction map analysis
6.2. 고찰
(1) 1차 실험의 실패 원인 추정
(2) 2차 실험에 대한 고찰

본문내용

제한효소 지도 분석
Restriction map analysis
Key Words: Restriction, Map analysis, Mapping, Plasmid, EcoRI, PstI, E.coli JM109, pGEM-T-Easy-DXS
Abstract
제한효소 지도 분석이란 특정 DNA를 특정 제한효소로 절단하여 이 제한효소로 절단되는 부위가 DNA상에 존재하는지, 존재 한다면 어느 위치에 존재하는지를 확인하는 과정이다. DNA-plasmid에는 특정 제한효소로 절단되는 부위가 적어도 한 부위 이상은 존재하며 plasmid는 여러 가지 제한효소에 의해 절단 반응을 일으킨다.⑴ Plasmid에 제한효소를 가하여 절단 반응을 일으켰을 때 이를 확인하는 방법은 전기영동이며 전기영동 후 gel을 확인하면 절단 된 부위에 band가 나타나므로 plasmid의 어느 위치에서 절단반응이 일어났는지를 판단 할 수 있다. 이 실험에서는 제한효소로 EcoRI과 PstI을 사용 하였으며 EcoRI에 의해 절단된 부위와 PstI을 통해 절단된 부위, EcoRI과 PstI을 혼합해서 반응 시켰을 때 절단된 부위를 조합하여 plasmid의 분자량과 plasmid 상의 어느 부위에 어느 제한효소가 작용 하는지를 알아보고 이를 토대로 대상이 된 plasmid의 대략적인 madel을 파악하는 것에 중점을 두었다.

참고 자료

제한효소 지도 분석법, 한국산업기술대학교, 생명화학공학과, 생물공학실험 발표자료, 이훈성 외 3명 作