Agrobacterium을 이용한 벼의 형질전환체 생산

소개글

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목차

1.Theory
2. Materials
3. Methods
4. 고찰

본문내용

.. 1.Theory
Agrobacterium tumefaciens은 상처 부위로부터 식물에 들어가고 상처 근처에 있는 식물세포를 형질전환해서, 크라운 골(crown gall)이라는 일종의 종양 형성을 유도하게 된다. Agrobacterium은 Ti 플라스미드(Ti plasmid)라고 불리는 거대한(약 200,000 염기쌍) 플라스미드를 가지고 있다. 이 세균이 식물세포와 접촉하면, T DNA(약 23,000 염기쌍)라고 불리는 단편이 Ti 플라스미드로부터 식물세포의 핵으로 옮겨지고, 형질전환을 하는 동안에 식물의 염색체 중 1개의 랜덤위치에 짜여져 들어가게(integrate) 된다. 이 현상은 DNA가 무핵생물로부터 유핵생물로 옮겨지는 드문 예가 되고, 자연적으로 일어난 유전공학이라고 말할 수 있다.
T DNA는 식물의 대사 산물을, 세균에 있어서 중요한 2가지 부류의 화합물로 변환하는 효소를 코드하고 있다. 첫 번째 부류는, 식물 호르몬인 옥신(auxin)과 시토키닌(cytokinin)이 된다. 이들은, 형질전환된 세포의 증식을 촉진시켜서, 크라운 골 종양을 만들게 된다. 두 번째 부류는, 오핀(opines)이라는 것으로, 보통은 볼 수 없는 아미노산의 1군이고, 세균의 먹이(food source)가 된다. 오핀은 종양내에서 고농도로 생산되고, 주위로 분비된다. 오핀은 Agrobacterium에 의해서만 대사되며, 효소도 Ti 플라스미드 상의 어딘가에 코드된 것을 사용한다. 이와 같이, 이 세균은 유용한 영양소를 다른 어떤 생물에서는 무익한 형으로 바꾸어서 독점하고 있다.
2. Materials
70% 알코올, 락스-3차증류수-tween20혼합액(락스:증류수:tween20 = 75:25:2~3방울), 멸균수
배지(culture medium ; N6, N6-Co, AB, YEP, N6-Ce, Se, MS, MS free), 고품벼
인습기, 필터페이퍼, 멸균대, 오토클레이브, 명암 조절가능 배양선반(인큐베이터)
3. Methods
<1> 종피제거(인습기 이용)
배 부분이 최대한 덜어져 나가지 않도록 인습기 사용
<2> 치상(N6배지)

참고 자료

없음