(분자유전학) 형질전환 - 결과&고찰

소개글

분자유전학 실험 레포트 입니다.

목차

Ⅳ. Result

Ⅴ. Discussion

본문내용

Ⅴ. Discussion
이번에 실험한 Transformation은 외부 DNA 가 Cell 내부로 주입되어 Cell의 Chromosome에 합쳐져서 Replication됨으로써 외부 Gene의 유전형질이 발현되어 특정한 Cell의 유전형질이 변화되는 현상을 말한다. 먼저 1)competent cell에 0.1M MOPS+50mM CaCl2 100㎕를 넣고 pipeting 해준다. 여기에서 competent cell에 대해 알아보면, E.coli를 포함한 대부분의 박테리아는 일반적인 환경에서 극히 제한된 양의 DNA만을 받아들이는데 이러한 종류를 효과적으로 transformation하기 위해 박테리아는 DNA를 받아들이는 능력을 향상시키는 물리적, 화학적 형태의 처리가 필요하다. 정상의 박테리아 cell에 이러한 처리를 가하여 외부 DNA가 잘 들어갈 수 있도록 만든 cell이 바로 competent cell이다. 화학처리에 이용되는 시약에는 Calcium Chloride, Manganase Chloride, Hexamminecobalt Chloride, Dimethyl Sulfoxide (DMSO)와 같이 여러 가지가 있는데. Calcium chloride(CaCl2)가 가장 많이 쓰인다.
CaCl2 처리하는 이유로 DNA의 charge는 negative charge인데 cell의 membrane도 negative charge이기 때문에 transformation시키기 위해 cell 내부로 DNA를 삽입시킬 때 척력이 발생하게 되어 cell 내부로 DNA 삽입이 제대로 일어나지 않게 된다.

참고 자료

http://kbiotec.kijeon.ac.kr/pro_master/Lee_sun_hee/lee2_3_01.asp
http://biochemistry.yonsei.ac.kr/biochem_molecular/gene_cloning_18.php
http://bh.knu.ac.kr/~bskim/transfm.htm
http://blog.naver.com/gamble0726/140065587883