서울대 생물실험 그람염색법

소개글

서울대 생물실험 그람염색법

목차

1. Introduction
2. Materials & Apparatus
3. Methods
3. Result
4. Discussion
5. References

본문내용

1. Introduction
원핵 세포란 세포 내부에 핵막이 존재하지 않는 세포로서 일반적으로 bacteria를 지칭한다. 이러한 bacteria를 관찰하는 유용한 방법 중 대표적인 것이 Gram염색법이다. Gram염색법은 색깔에 따라 Gram양성균과 Gram음성균으로 나누어지는데, 그 차이는 세포벽의 구조적인 특성에 기인한 것이며 bacteria를 구분짓는 중요한 요소가 된다. Gram음성균의 대표적인 예는 E. coli 이며, Gram양성균의 대표적인 예는 Staphylococcus aureus이다.
Gram염색법에는 세 가지 서로 다른 straining solution (crystal violet, Gram`s iodine, safranine-O)이 사용되는데, Gram양성균은 CV-I complex가 탈색되지 않아 violet색을 띄며, Gram음성균은 CV-I complex가 alcohol에 의해 탈색되어 safranine-O색깔인 red로 염색되어 보인다.

2. Materials & Apparatus
Crystal violet, Gram`s iodine, safranine-O, 95% ethyl alcohol, slide glass, pasteur pipet, alcohol lamp, loop. D.W., Broth cultured E. coli, Staphylococcus aureus, bacillus, lactobacillus, microscope, immersion oil, xylene, lens tissue

3. Methods
① Slide glass위에 bacteria culture broth를 loop로 smearing한 후 air dry
② Crystal violet으로 30초동안 staining
③ Tap water로 back washing후 air dry
④ Gram`s Iodine으로 30초동안 staining
⑤ Tap water로 back washing후 air dry
⑥ 95% ethyl alcohol로 destaining
⑦ Tap water로 back washing후 air dry
⑧ Safranine-O로 30초동안 counter staining
⑨ Tap water로 back washing후 air dry
⑩ Immersion oil 한방울 떨어드린 후 현미경으로 관찰 (X1000)

참고 자료

․종합 미생물학, 미생물학 분과회, 3판, 학사(윤), 1987, pp46-47
․생물과학, 신성, 강영희, 김영진, 김윤직, 박봉, 이정주, 하재청, 아카데미서적, 1987년, pp. 464-465page
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․Advanced Cell Biology, L.M. Schwartz and M. M. Azar, Van Nostrand Reinhold Co., 1981, pp. 240-249
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