미생물 생리(결과)

소개글

미생물 생리

목차

1. 재료 및 방법

2. 실험 결과

3. 실험 고찰

4. 참고문헌

본문내용

3. 실험 고찰
이번 실험은 ‘미생물 생리’ 실험으로 Lactose를 발효하는 세균과 락토오스를 발효시키지 못하는 세균을 분별해보는 실험이다. 먼저 실험균주로는 E. coli를 사용하였는데, 정상적인 E. coli는 Lactose를 발효시켜 젖산을 생성할 수 있다. 하지만 ‘미생물 생리’ 실험으로 쓴 E. coli는 BL21종과 DH5α 두 종류를 사용하였는데, 돌연변이로 인해 두종의 한 종은 Lactose를 발효하지 못하는 E. coli이다. E. coli내에서 Lactose 대사를 위해 필요한 효소를 암호화 하고 있는 유전자 Set은 Lac operon이다. 그중 Lactose를 젖당으로 발효하는데 결정적인 역할을 하는 유전자가 LacZ로서 실험균주로 쓰인 두 균중 하나는 Lac operon내에 LacZ 유전자가 결여되어 있어 Lactose를 발효시키는 효소가 만들어지지 못할 것이다. 또 Lactose를 발효시키는 효소가 생성되지 못하게 하는 다른 유전자의 돌연변이나 전사나 번역에 관여하는 단백질에 구조적 변화가 발생할 수 있다. 먼저 Lac Repressor를 발현시키는 유전자의 돌연변이이다. Lac repressor를 발현시키는 유전자의 돌연변이에 의해 Lac repressor의 구조적 변화가 생겨 Lactose라는 Inducer가 Lac repressor에 결합을 못할 수도 있다. 그렇게 되면 Lactose가 있더라도 Lac repressor는 계속적으로 Lac operon의 Operator에 결합을 하여 Lac operon의 발현을 방해한다. 두 번째는 cAMP Activator Protein를 발현시키는 유전자의 돌연변이이다. cAMP Activator Protein은 주변에 glucose가 없으면 E.coli 세포질안에 cAMP의 농도가 높아지고 cAMP는 cAMP Activator Protein과 결합하여 Lac operon의 CAP 자리에 결합을 하여 Lac operon의 전사를 촉진한다. 그러나 cAMP Activator Protein을 발현시키는 유전자의 돌연변이로 인해 cAMP Activator Protein의 구조적 변화가 생긴다면 cAMP와 결합을 하지 못하여 Lac operon의 CAP site에 결합을 하지 못하여 Lac operon의 전사를 촉진시키지 못할 것이다. 또 다른 방법들도 Lac operon에 관련된 유전자의 돌연변이나 단백질의 구조적 변화 때문에 Lac operon의 발현을 못하게 하는 것이 많이 있을 것이다.

참고 자료

<인터넷>
위키백과사전(MacConkey agar) : http://en.wikipedia.org/wiki/MacConkey_agar
<책>
김영희,「분자생물학 실험서」, 월드사이언스, 2008
오계현,「Brock의 미생물학 12판」, 바이오사이언스(주), 2009