회분식 미생물의 배양 (결과)

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목차

1. 실험 제목
2. 실험 방법
3. 결과 및 토의
4. 논의 및 고찰

본문내용

2. 실험 방법

① 배양중인 E. Coli의 LB broth에서 적당량(5 ml)을 흡광 광도계로 600nm 파장에서 흡광 도를 측정한다. 흡광도는 매번 측정시마다 0.5값을 넘지 않게 희석하거나 직접 사용한 다. 흡광계의 영점조정은 LB broth를 사용한다.
② 흡광도의 측정은 박테리아를 접종한 후에 매시간 행한다. 박테리아가 성장함에 따라서 흡광도가 올라갈 경우 0.1㎖를 따서 LB broth 9.9㎖로 희석하거나 혹은 적당한 비율로 희석하여 모든 흡광도 측정값이 0.5를 넘지 않도록 한다.
③ 배양온도별(30℃혹은 37℃)로, 배양시간에 따른 탁도의 변화를 semi-log 그림표 용지를 사용하여 그려본다. 또한 탁도와 세균수의 상관관계 그림표를 그려본다.
④ 세균의 종류나 배지 등의 배양조건에 따라 다르나 E. Coli의 경우 O.D.600의 값이 1이 면 세균 수는 8.0 ×108 마리/㎖이며 2이면 1.5 ×109 세균/㎖정도이다.
⑤ 탁도 (O.D.)값이 정상을 넘어서는 시간까지 행한다.
⑥ 탁도 값이 정상을 넘어서면 배양을 중단하고 배양중인 박테리아를 5000 rpm, 10분간 원심 분리하여 배양한 박테리아를 수집하여 -70℃ 냉동고에 보관하여 다음 실험에 사용 한다.
⑦ 매시간 측정한 O.D. 값을 배양시간에 따라 도시하여 미생물 성장곡선을 그려 본다.

참고 자료

없음