회분식 미생물의 배양 (예비)

소개글

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목차

1.실험제목
2.실험목적
3, 이론
4. 실험장치
5. 실험방법
6.추론

본문내용

여기서는 평판계수법과 탁도측정법을 병행하고, 상호 비교해 보도록 한다.
a. 배양중인 E. Coli의 LB broth에서 적당량(5ml)을 흡광 광도계로 600nm 파장에서 흡광도 를 측정한다. 흡광도는 매번 측정시마다 0.5값을 넘지 않게 희석하거나 직접 사용한다. 흡광계의 영점조정은 LB broth를 사용한다.
b. 흡광도의 측정은 박테리아를 접종한 후에 매시간 행한다. 박테리아가 성장함에 따라서 흡광도가 올라갈 경우 0.1㎖를 따서 LB broth 9.9㎖로 희석하거나 혹은 적당한 비율로 희석하여 모든 흡광도 측정값이 0.5를 넘지 않도록 한다.
c. 배양온도별(30℃혹은 37℃)로, 배양시간에 따른 탁도의 변화를 semi-log 그림표 용지를 사용하여 그려본다. 또한 탁도와 세균수의 상관 관계 그림표를 그려본다.
d. 세균의 종류나 배지등의 배양조건에 따라 다르나 E. Coli의 경우 O.D.600의
값이 1이면 세균수는 8.0 ×108 마리/㎖이며 2이면 1.5 ×109 세균/㎖정도이다.
e. 탁도 (O.D.)값이 정상을 넘어서는 시간까지 행한다.
f. 탁도값이 정상을 넘어서면 배양을 중단하고 배양중인 박테리아를 5000 rpm, 10분간 원 심분리하여 배양한 박테리아를 수집하여 -70℃ 냉동고에 보관하여 다음 실험에 사용한 다.
g. 매시간 측정한 O.D. 값을 배양시간에 따라 도시하여 미생물 성장곡선을 그려본다.
h. 지수성장기의 미생물의 비성장속도 값을 그래프에서 구한다.

참고 자료

없음