단백질의 정성 반응 레포트

소개글

단백질의 정성 반응 레포트

목차

1. Subject
2. 재료 및 기구
3. 실험 목적과 원리
4. 실험 방법
5. 실험 결과
6. 고찰
7. 요약
8. 참고문헌

본문내용

◈목적: ① 단백질 및 아미노산의 구조적 특이성과 정색반응간의 관계 탐색
② 시약의 종류에 따라 나타나는 색깔 확인 및 대조
③ 천연단백질 시료간의 반응결과 및 차이점 비교 평가

◈원리: Ninhydrin reation : α-amino acid, peptide, protein 확인 반응
아미노산은 닌히드린과의 반응을 통해서 쉽게 확인 될 수 있다. 닌히드린(혹는 트리케토히드린덴 수화물)은 매우 강한 산화제로서, 알파 아미노 작용기의 산화적 탈아민화를 일으킨다. 즉 닌히드린은 아미노산을 산화시켜 암모니아와 이산화탄소를 유리시키고 알데하이드를 생성하여 자신은 환원되어 히드린단틴(hydrindantin)이 된다. 이때 유리 된 암모니아는 히드린단틴 및 잔존하는 닌히드린과 반응하여 570nm에서 분광학적으로 정량할 수 있는 보라색 생성물 루헤만 보라(Rhhemann’s Purple)를 형성한다. 이 반응은 아미노기를 가지는 단백질, 펩티드, 아미노산에 대해 양성을 나타내며, 암모니아에 대해서도 양성반응을 나타낸다.

<중 략>

Biuret reation은 peptide bond가 2개 이상인 뷰렛 구조가 2가의 구리이온과 반응하여 보라색의 착 화합물을 형성하는 성질을 이용하여 Dipeptide bond 이상의 단백질을 확인하는 반응이다. 대부분이 단백질은 기본적으로 무수히 많은 펩티드 결합을 하고 있기 때문에 이 용액에 양성 반응을 띤다. 이 방법은 색소성분에 의한 영향이 적고 측정에 영향을 미치는 물질이 비교적 적다. 이 방법은 적어도 2 ~ 4mg의 단백질이 있어야 측정이 가능하다, 고농도의 암모니움염이 존재하면 반응에 영향을 미치며 단백질의 종류에 따라 색깔이 약간 변한다. 예를 들어 젤라틴의 경우 분홍색을 띤 자주색을 보인다. 많은 양의 지방이나 탄수화물이 있으면 불투명해지기도 하며, bovine serum albumin에 의해 색이 표준화 되어야하는 단점이 있다. 시약이 검은색 또는 붉은색의 침전물이 보이면 잘못 만들어 졌거나 오염이 되었을 가능성이 높으므로 다시 만들어야한다. 이번 실험에서는 A,E,G,H,J 시료가 반응하였고, 이론상으로는 처음에 황산구리 용액을 1-2방울 넣으면 적색이 되었다가, 더 넣을 시 청자색을 거쳐 자색이 된다. 하지만 실제 실험에서는 처음 반응색이 보라색과 청색, 황색 등을 띠는 시료가 있었다.

참고 자료

없음