대장균 정성실험

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1. Introduction

(1) 실험의 목적
이번 실험은 시료에 대장균군의 유무를 확인하는 대장균군 정성실험이다. 대장균군을 검출하기 위한 실험방법은 식품의약안전청의 식품공전에 따라 추정시험, 확정시험, 완전시험으로 구성되어 있다. 대장균군의 유무를 확인하는 것은 예로부터 분변 오염 지표균 또는 오염 지표균이기 때문에 중요하다. 그러므로 대장균군의 추정시험, 확정시험, 완전시험이 어떠한 원리이고 어떤 방법으로 진행되는지를 이해해야 한다. 그리고 대장균군은 어떠한 그룹으로 이루어져 있고 대장균군의 특징을 알아야 할 것이다. 이 실험은 매우 실용적이기 때문에, 식품기사 자격증 및 회사에서도 일상적으로 쓰인다. 때문에 이 실험과정 및 방법에 대해 숙련시킬 필요가 있기에 실험을 하는 것이다. 마지막으로 실험에 사용하는 배지들의 종류와 이 배지들의 역할과 기능을 알아야 하며, streaking은 어떻게 하고, streaking의 목적을 알아야 할 것이다.

(2) 대장균군의 추정, 확정, 완전 실험(정성실험)
가. 추정실험
LB배지를 넣은 발효관에 시험용액을 넣은 다음 35±1℃에서 48±3시간 배양했을 때 gas 발생이 있으면 대장균군의 존재가 추정된다. 시험에 사용되는 발효관은 Durham발효관으로 Durham 발효관을 넣을 때 거꾸로 넣고, 121℃에서 15분간 고압 증기 멸균한다. 멸균 시험관을 식힌 후 시료를 1ml씩을 시험관에 넣은 다음 35±1℃에서 24±2시간 배양을 한다. 가스가 발생하면 정성실험인 추정시험을 양성으로 보고 확정시험 단계로 넘어간다. 만약 가스발생이 없는 것은 24±2시간 추가 배양을 한다. 이때까지도 gas가 발생하지 않았을 때에는 추정시험 음성으로 판단한다.

참고 자료

권동진. 2009. 식품미생물학 실험서. 신광출판사, p.172-174.
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