[생물학 실험보고서] PCR

소개글

PCR (Polymerase Chain Reaction)의 기본 원리를 이해하고, 적은 양의 DNA를 많은 양으로 증폭하고, 전기영동을 통하여 이를 확인하는 실험입니다.

목차

1. Abstract

2. Introduction

3. Materials and Methods

4. Data and Result

5. Discussion

6. References

본문내용

Abstract
이번 실험은 생명과학 실험의 기본이라 할 수 있는 PCR (Polymerase Chain Reaction)의 기본 원리를 이해하고, 적은 양의 DNA를 많은 양으로 증폭하고, 전기영동을 통하여 이를 확인하는 것이었다. Template는 [실험 5]에서 얻은 cDNA를 사용하였고, 합성재료인 dNTP와 합성을 개시하는 한 쌍의 primer, polymerase의 활성에 적합한 10X buffer와 부피를 맞추기 위하여 DIW를 넣어주었으며 높은 온도에서도 안정한 Taq polymerase를 사용하였다. Cycle은 Denaturation (95 ℃, 30초), Annealing (55 ℃, 30초), Elongation (72 ℃, 1분)을 한 cycle로 30 cycle을 돌렸다. PCR product를 전기영동 해본 결과, 예상 크기인 1.4 kb 와는 다른 650 bp 크기의 band가 나왔다.

Introduction
PCR (Polymerase Chain Reaction, 중합효소 연쇄반응)은 특정 DNA 부위를 특이적으로 반복 합성하여 원하는 fragment를 증폭 시키는 방법이다. DNA 양이 아주 적더라도 원하는 부분을 엄청난 양과 높은 정확도로 크게 늘릴 수 있고, 장비 또한 단순하기 때문에 간단하고 짧은 시간 내에 증폭할 수 있다.

<중 략>

Discussion
이번 실험은 PCR의 기본 원리를 이해하고, 적은 양의 DNA를 많은 양으로 증폭하고, 전기영동을 통하여 이를 확인하는 것이다. [실험 5]에서 얻은 cDNA가 template이고, 합성효소로서 Taq polymerase를 사용하였다. 실험 결과, 650 bp의 크기의 product가 나왔고, 이것은 예상 크기인 1.4 kb보다 작게 나온 것으로 원하는 DNA fragment가 증폭되었다고 볼 수 없다.

참고 자료

Sambrook J. and D. W. Russell, Molecular Cloning: A laboratory manual, 3rd ed., Cold Spring Harbor aboratory Press, Cold Spring Harbor, New York, U.S.A, pp8.1~8.24
Watson 외 5인, Molecular biology of the gene, 2008, 6th ed., CSHL Press, pp127~130
연세대학교 의과대학 생화학-분자생물학교실 http://biochemistry.yonsei.ac.kr/
http://bitesizebio.com/