Basic Cell preparation Technique

소개글

hemocytometer를 이용한 세포수 측정 실험 보고서

목차

1. Introduction

2. Materials and Methods

3. Results
(1) Cell counting
(2) Vital staining

4. Discussion

5. Literatures Cited or References

본문내용

1. Introduction

이번 실험에서는 일정한 부피의 배양액에 있는 포유동물의 세포의 수를 hemocytometer를 통해 counting하고, viral staining을 통해 살아있는 세포와 죽은 세포를 구별하여 세포의 생존율(%)을 계산해 본다.
혈구계산판(blood cell counting chamber, hemocytometer)에는 여러 종류의 계산판(Burker형, Turk형, Neubauer형, Thoma형, Fuuchs Rosenthal형 등)이 있다. 현재 우리나라에 많이 보급되어 사용되고 있는 것으로는 Spencer의 개량된 Neubauer counting chamber이다. 수기법에 의해 cell count에 사용되고 있는 개량형 Neubauer chamber용 cover glass들은 크기가 20✕26mm이며 0.4mm정도의 두께로 되어있다. Chamber용 특수 cover glass를 덮었을 때의 깊이가 0.1mm로 되어 있다. 각 counting chamber 우측면에는 깊이가 1/10mm이란 점이 확실하게 명기되어 있으며, 다른 용도의 cover glass를 사용하거나 side glass를 자른 것은 사용할 수가 없다. 개량된 Neubauer counting chamber 사용의 이점은 다음과 같다.

< 중략 >

4. Discussion
이번 실험은 hemocytometer를 이용하여 세포의 수를 세고, vital staining 작업을 통해 총 세포수와 죽은 세포수의 개수를 통해 생존율을 구해보는 실험이었다.
세포를 배양한 flask를 다룰 때에는 무균 상태에서 조작을 해야 flask가 외부의 곰팡이나 세균에 감염되지 않아 실험에 재사용할 수 있다. 하지만 이번 실험에서는 flask를 일회용으로 사용하기 때문에 실험실 테이블에서 그대로 사용하였다. Trypsin을 처리하고 flask를 흔들어 주었는데, 이 때 trypsin은 flask 바닥에 붙은 cell을 떼어내는 역할을 한다.

참고 자료

Byun, D. H., S. M. Kim, Y. S. Kim, E. J. Kim, I. S. Kim, I. J. Kim, I. H. Kim, I. T. Kim, S. J. Seok, S. O. Song, M. J. Shim, N. K. Lee, J. S. Lee, O. B. Jung, Y. K. Cho, and H. J. Cho. 2011. 표준 임상혈액학. 1st Ed., 대학서림. pp. 46-48, pp. 51-56.
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