Metabilic Flux Measurement 대사 유동 측정 실험 결과보고서

소개글

세포나 기관이 효소에 의하여 대사가 일어나면 대사산물이 생성되는데 이 대사산물의 양을 늘리거나, 새로운 대사산물을 생산하는 것이 metabolic engineering에서 가장 핵심적인 분야이다.
이를 위해서는 Metabolic Flux Analysis를 통해 미생물의 metabolic pathway를 분석하는 기술이 필요하며 이는 Material Balance와 Biochemical reaction equation을 통하여 미생물이 흡수하거나 분비하는 대사산물을 정량화하여 대사회로의 흐름을 효율적으로 예측할 수 있게 해준다.
이 방법은 genetic engineering에서 target을 identify하는데 필요한 intracellular flux distribution을 계산, 분석하는데 유용하게 사용된다.

목차

Ⅰ.서 론

Ⅱ.이론적 배경
1. Metabolic Flux(대사유동)
2. Metabolic flux Analysis(MFA)
(1) Metabolic flux Analysis
(2) Stoichiometric model
(3) Metabolic flux calculation
3.Liquid Chromatography

Ⅲ. 험장비 및 시약

Ⅳ. 실험방법

Ⅴ.실험 결과 및 분석
1. 실험결과
2. 결과분석

Ⅵ. 결 론

-Nomenclatures
-References

본문내용

1. 서론

세포나 기관이 효소에 의하여 대사가 일어나면 대사산물이 생성되는데 이 대사산물의 양을 늘리거나, 새로운 대사산물을 생산하는 것이 metabolic engineering에서 가장 핵심적인 분야이다.
이를 위해서는 Metabolic Flux Analysis를 통해 미생물의 metabolic pathway를 분석하는 기술이 필요하며 이는 Material Balance와 Biochemical reaction equation을 통하여 미생물이 흡수하거나 분비하는 대사산물을 정량화하여 대사회로의 흐름을 효율적으로 예측할 수 있게 해준다.

< 중략 >

Metabolic Flux Analysis는 우리가 분석하고자 하는 계의 생화학적 반응 네트워크의 유동 분포를 계산하는 효과적인 방법이다. 이 방법을 통하여 미생물이 흡수하거나 분비하는 대사산물을 정량화하여 대사회로의 흐름을 효율적으로 예측할 수 있게 한다. 이는 Metabolic Engineering에서 대사산물의 양을 늘리거나 새로운 대사산물을 생산하기 위하여 대사 유동을 분석하는데 핵심적으로 쓰이고 있다.

이번 실험에서는 Metabolic flux Analysis를 통하여 E.coli의 Metabolic pathway를 이해하고 Metabolic flux를 결과값으로써 도출해내었다 E.coli는 Metabolic pathway과정에서 culture를 통하여 흡수된 glucose가 Acetic acid와 CO2로 배출이 된다. 우리는 Liquid Chromatography를 통하여 first peak에서는 Glucose를 Second peak에서는 Acetic acid를 관찰하였고 peak Area를 통하여 Concentration을 구하였다.

최종적으로 E.coli metabolic pathway 과정에서 생성된 중간생성물들의 Flux를 나타낸 행렬을 구하였다. 결과값을 통하여 E.coli의 배양시간이 길어질수록 모든 중간생성물과 생성물의 flux 값이 감소함을 알 수 있었다.

참고 자료

1. Biochemical reaction networks- Metabolic Flux Analysis
http://www.chemeng.lth.se/kte071/MFA.pdf
2. Metabolic Engineering
http://mbel.kaist.ac.kr/lab/research/metaeng_ko.html
3. 액체 크로마토그래피의 원리 및 이해 (HPLC)
http://blog.naver.com/lovecat2010?Redirect=Log&logNo=10080977084
4. www.wikipedia.org (위키피디아 백과사전)
6. www.doopedia.co.kr (두산백과사전)
7. http://100.naver.com/ (네이버 백과사전)