[서강대학교 현대생물학 실험레포트] Direct PCR & GMO

소개글

Direct PCR & GMO에 대한 서강대학교 현대생물학 실험레포트입니다.

목차

1. Abstract
2. Introduction
3. Materials & Methods
4. Discussion

본문내용

이번 실험은 direct PCR을 이용하여 실험에 사용된 식물이 GMO인지의 여부를 판별하는 것이다. GMO란 유전자변형생물체(genetically modified organism)의 약자로서, LMO(livi- ng modified organism)라고도 하는데, 생명공학기술(유전자 변형기술)을 이용하여 인위적으로 새롭게 조랍된 유전물질을 가지도록 변형된 동물, 식물, 미생물을 말한다.

<중 략>

우선 PCR mixture를 만드는데 하나의 sample당 50㎕씩 7개가 필요하므로 원래 volume에 7.2배하여 한 번에 만든 후 0.2ml PCR tube에 50㎕씩 7개로 분주한다.(<Table 1>) 식물체의 어린 잎 부분을 가위로 잘라서 glass plate에 올려놓고 0.5mm puncher를 이용하여 0.5mm 잎 조각을 전체 잎으로부터 떼어내는데 2-3회 정도 반복하여 확실히 분리시킨다.
puncher의 끝부분을 PCR tube내로 넣고 PCR solution에 잠기게 하고 puncher의 윗부분을 약 20회 정도 눌러서 잎 조각이 분리되게 한다. 사용한 puncher는 4% NaClO 용액에 앞부분을 담근 후 puncher의 윗부분을 20-30회 눌러 씻고 paper towel로 용액을 완전히 제거한 뒤 물로 같은 방법으로 씻어서 사용한다.

<중 략>

본 실험에서는 GMO판별을 위하여 DNA 분석법에 속하는 PCR 분석법 중 direct PCR을 진행하는데 이것은 보통의 PCR과는 달리 template DNA extraction 단계를 거치지 않고, sample 조직을 이용하여 바로 PCR을 수행할 수 있으며 소량의 sample만으로 빠르게 원하는 DNA 부분만을 증폭하여 신속히 그 결과를 확인할 수 있다. 간편성과 sensitiviy로 인해 시료량이 적을 경우 사용하기 적절하지만 <Figure 3>에서 볼 수 있듯이 band가 지나치게 두껍게 나타난다면 size를 확인하는데 어려움이 있고 다른 band와 겹쳐서 해석하는데 오차의 원인이 될 수 있으므로 결정적인 결과를 내는데 장애물이 될 수도 있다.

참고 자료

권영명 외 14명, 최신 식물생리학, 아카데미서적, 2003, pp.452-458
정재동 외 20명, 최신 생물공학(식물편), 경북대학교 출판부, 1996, pp.199-202 p.275