서울대-배지만들기

목차

1. ABSTRACT
1) 실험목표
2) 실험이론

2. MATERIALS & PROCEDURE
1) 실험재료
2) 실험방법

3. RESULT

4. DISCUSSION

5. References

본문내용

1. ABSTRACT
1) 실험목표
형질전환된 E.Coli를 선별해서 배양할 수 있는 배지를 만들고, E.Coli의 형질전환을 수행해서 직접 각자가 만든 배지에 포말해본다.

2) 실험이론
① Plasmid & Vector
DNA 재조합 기술에서 숙주가 무엇이든 DNA를 세포로 운반하는 운반체가 필요한테 이러한 운반체를 벡터(Vector)라고 한다. 벡터는 새로운 DNA를 숙주세포로 운반할 수 있다. 새로운 DNA를 세포에 삽입하는 이유는 그것을 단순히 숙주세포에 들어가도록 하는 것이 아니라, 숙주세포가 분열함에 따라 그것을 복제하도록 하는 것이다. 벡터가 숙주세포에 들어가면 숙주의 DNA와 마찬가지로 복제되어야 한다. 복제되기 위해서는 DNA 중합효소가 복제 원점을 인식해야한다. 즉, 새로운 DNA - 벡터 - 는 복제단위를 가지고 있어야 된다. 대표적으로 벡터는 4가지 특성을 가지고 있어야한다. 첫째, 숙주세포에서 독립적으로 복제할 수 있는 능력을 가지고 있어야 한다. 둘째, 벡터를 절단하고 새로운 DNA와 조합하도록 하는 제한효소에 대한 인식서열을 가지고 있어야한다. 셋째, 표지성질이 있어야 한다. 숙주세포에서 그 존재를 알릴 유전자가 있어야 되는데 주로 antibiotics resistance gene과 GFP gene이 사용된다. 넷째, 쉽게 분리될 수 있도록 숙주 염색체에 비하여 작은 크기여야 한다.
플라스미드(plasmid)는 자연적으로 존재하는 세균 염색체이며, 유용한 벡터에 요구되는 4가지 특성을 모두 가지고 있다. 먼저 E.coli의 플라스미드는 작다. 더 나아가 크기가 작기 때문에 플라스미드는 가끔 주어진 제한효소에 대하여 오직 하나의 인식 자리를 가지고 있다. 이 특성은 플라스미드가 오직 하나의 위치에서만 새로운 DNA의 삽입을 허락하기 때문에 중요하다. 플라스미드는 제한효소로 잘릴 때 점착성말단을 가진 선형의 분자로 전환된다. 같은 제한효소로 잘린 다른 DNA 절편의 점착성 말단은 플라스미드의 점착성 말단과 염기쌍을 형성하여 새로운 원형 플라스미드가 될 수 있다.

참고 자료

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