배지, 미생물키우기

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실험의 목적
미생물을 배양하고, 동정하기 위해서는 미생물의 종류에 따라 배지가 필요한데, 실험실에서는 다양한 생물들이 시약, 물, 공기, 초자류 등에 존재하고 있어 이것들이 배지에 자라게 되면 원하는 실험결과를 얻을 수 없다. 따라서 배지는 미생물을 접종하기에 앞서 배양기 내의 모든 미생물들을 시멸시키거나 제거해야한다. 여러 가지 멸균법중 가장 보편적 방법을 통해 실험하고 확인한다.

실험의 원리

미생물은 토양, 공기, 물, 음식물, 폐수, 동물의 체내외에서 발결된다. 즉 우리의 주변 환경으로부터 무수히 많은 미생물들을 접하게 된다. 이런 미생물은 크기가 너무 작기 때문에 현미경적 관찰만으노는 그 선상을 확실히 파악할 수 없다. 따라서 미생물의 연구를 위해서는 미생물을 배양하여야 하는데 배지에서 미생물성장에 필요한 물, 탄소원, 질소원, 무기이온, 아미노산, 비타민 및 발육인자가 적당히 포함되어야 한다. 그 외에서 산소요구성, 배양온도, 배지의 조건에 따라 세균의 성상이 달라질 수 있다.

1.배지(Medium)

배지란 적당량의 영양성분을 혼합해서 밈생물을 생존시키고 지속적으로 증식시키기 위해서 인공적인 증식환경이 만들어진 상태를 말하는데 이들 배지는 사용목적, 배지의 성분, 배지의 물리적 성상에 따라 몇 가지로 나눌 수 있다.

<중 략>

·배지만들기
(1) autoclave 에 물이 들어 있는지 확인했다.
(2) 배지 1000㎖을 기준으로 NaCl 15g, yeast extract 5g, bacto tryptone 10g, agar 5~10g 의 무게를 저울을 사용하여 넣어줬다.
(3) 플라스크에 NaCl 10g, yeast extract 5g, bacto tryptone 10g 을 넣어주고 잘 녹여준 다음, 플라스크의 눈금을 1000ml 이 되도록 증류수를 채웠다. 여기에 agar 15g 을 넣어줬다.
(4) autoclave 에 넣어주고 노출시간을 15분에 맞췄다
(5) 멸균된 용액이 매우 뜨거우므로 50~60℃가 될 때까지 냉각했다.
(6) 적당히 식힌 용약을 클린벤치에서 배지를 petri dish 에 부었다.
(7) 부은 다음 뚜껑을 반쯤 열어 건조시켰다. 약 15분~20분이면 배지가 굳는다.

참고 자료

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