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Agarose gel electrophoresis

*지*
최초 등록일
2013.03.24
최종 저작일
2013.01
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없음

본문내용

TAE; Tris-acetate-EDTA
TBE; Tris-borate-EDTA
둘다 DNA 전기영동에 사용합니다.
일반적으로 알려져 있기로는 TBE가 TAE 보다 buffering capacity가 더 좋아 전기영동을 길게 할 경우 TBE가 더 적합하다고 하는 군요.
또한 TAE는 긴12kb)를 전기영동할 때, TBE는 보다 짧은 크기의 DNA를 전기영동할 때1 kb) 좋다고 합니다.
그러나 DNA를 elution 할 때는 borate가 방해하기 때문에 TAE를 주로 사용합니다.
TAE는 너무 반복해서 사용할 경우 DNA band가 smear해 질 가능성이 높습니다.
TBE는 좀 더 오래 사용가능합니다. buffering capacity가 더 좋기 떄문이지요.

그러나 실제 실험실에서는 보통 TAE를 더 많이 사용합니다.
gel elution을 많이 하는데다가 TAE, TBE를 번갈아 가며 사용하면 아무래도 헷갈릴 가능성이 높아서.TAE만 사용하더라도 실험에는 큰 무리가 없습니다.
acrylamide gel을 이용해서 전기영동하는 경우는 대체로 TBE를 사용합니다.
이 경우 buffering capacity가 더 좋아야 하기 때문인 것 같구요. 또한 TAE에 비해서. high voltage에서 열도 덜 납니다.

참고 자료

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