BCA(Bicinchoninic acid)법에 의한 단백질 정량

목차

1. 실습 주제
2. 실습 개요 및 목표
3. Introduction
4. Materials
5. Methods
6. Results & Discussion
7. Reference

본문내용

1. 실습 주제
BCA(Bicinchoninic acid)법에 의한 단백질 정량

2. 실습 개요 및 목표
단백질의 정량을 위하여 일반적으로 이용되는 BCA Assay를 통해서 미지 시료의 단백질 농도를 정량한다.

3. Introduction
이번 실험에서는 Bicinchoninic AcidAssay법을 통해 단백질을 정량하였다. Bicinchoninic Acid Assay는 Pierce방식이라고도 하는데 샘플 내에 있는 단백질 양을 측정하고자 할 때 쓰이는 것으로서, 단백질이 구리 이온을 환원 (Reduction) 시킬 수 있는 성질을 이용한다. 단백질에 의해 환원 된 구리 이온은 BCA용액과 반응을 해서, 보라빛의 화합물을 생성하게 된다. 이 화합물은 빛의 특정 영역(562nm)에서 구리 이온이 담긴 용액과 BCA용액 각각보다 빛의 흡수율이 높기에, spectrophotometer를 사용해서 측정하면 흡수율 차이를 측정할 수 있다. Lowry assay의 변형된 최근의 새로운 방법이다. BCA정량법의 장단점에 대해 조사해 보았다.

<중 략>

그래프에서의 x축은 BSA Solution의 농도 (0, 0.125, 0.25, 0.5, 1, 2mg/ml) 를 나타내고 y축은 농도에 따른 흡광도를 나타낸다. 추세선을 그려보니 직선식은 y= 0.090x-0.147의 식을 가졌고 R제곱 값은 0.868으로 나타났다.
위에서 구한 직선식에 대입하여 Sample로부터 얻은 흡광도를 이용하여 용액 내 단백질의 농도를 계산해 보았다. 아래의 표를 보면 3T3-L1과 C2C12의 농도를 알 수 있다.

참고 자료

약품 생화학 실험, 신일북스
약학실습1 프린트
위키피디아 백과사전
http://kin.naver.com/qna/detail.nhn?d1id=11&dirId=1116&docId=63694532&qb=YmNh&enc=utf8§ion=kin&rank=1&search_sort=0&spq=0&pid=RanNL35Y7thssZ3Q7vhssc--076312&sid=UFPcLZ@3U1AAAH05D-Ehttp://blog.naver.com/shinek20?Redirect=Log&logNo=90015024016
http://terms.naver.com/entry.nhn?docId=425042&mobile&categoryId=359