[생물학실험] [서울대] 효소, 아밀라아제, 효소의 활성 (Enzymes)

소개글

아밀라아제를 이용한 효소활성에 대한 실험 보고서입니다. 다음의 3가지 실험으로 구성되어 있습니다.
포도당 용액을 이용하여 Standard curve 그리기
침 안의 아밀라아제 활성 확인하기
Bacillus균 유래 아밀라아제 활성 확인하기
효소 전반과 Amylase에 대한 설명(자세히), 지시약의 원리 등에 대해서도 나와 있습니다.
논의 풍부, 참고문헌 인용 완벽

목차

I. 실험 목적
II. 이론적 배경
III. 실험 재료
IV. 실험 방법
V. 실험 결과
VI. 논의

본문내용

I. 실험 목적
① 효소의 원리, 활성과 변성에 대해 이해한다.
② Spectrophotometer를 이용한 enzyme assay 방법을 이해한다.

II. 이론적 배경
효소 (Enzyme)
효소란 생체 내에서 일어나는 각종 화학 반응의 촉매 역할을 하는 단백질을 말한다. 효소는 반응의 활성화 에너지(Activation energy, EA)를 낮추어 작용하는데, 이때 활성화 에너지란 화학 반응이 진행되기 위한 최소한의 에너지를 뜻한다.

그림 1 효소의 유무에 따른 EA 변화3)

기질(substrate)은 효소와 작용하여 반응을 일으키는 물질을 말한다.

<중 략>

그림 5에서 Standard curve의 포도당의 농도와 흡광도가 비례한다는 것을 알 수 있다. 이 원리를 Beer`s law라 한다.
그러나 상관계수는 R2=0.916으로 그리 높지는 않은 편이다. 여기에는 두 가지 해석을 해 볼 수 있다. 첫 번째 원인은 실험상의 오류이다. 포도당의 농도를 맞추지 못했거나 흡광도의 측정에 오차가 생길 수 있다. 두 번째는 이상 용액과 실제 용액의 차이가 원인일 수 있다. 그래프를 자세히 관찰하면 0.2%까지는 농도와 흡광도가 비례하나 그 후에는 증가폭이 작아지는 것을 볼 수 있다. 이는 실제 용액의 특성 때문인데,

<중 략>

실제로 사람과 Bacillus amyloliquefacience의 진화적 유연관계는 매우 멀기 때문에 같은 기능을 하는 효소라도 활성 자리의 구조만 비슷할 뿐 1차 아미노산 서열은 매우 다를 것으로 예측된다.

6. 흡광도를 측정할 때 목적에 따라 파장대를 달리하는 이유는 무엇인가?
전이 금속의 전자는 특정 파장의 빛을 흡수하면서 들뜬 상태가 되고, 우리 눈에는 그 보색의 색깔이 보이게 된다. 이때 금속의 이온별로 흡수하는 빛의 파장이 다르기 때문에 흡광도를 측정할 때 파장대를 조절하는 것이다.

참고 자료

안용근, 酵素化學, 청문각, p. 47-53, 1993
정동효, 효소학개론, 대광서림, p. 131-141, 2008
Campbell et al, Biology, 8th edition, Pearson, 2008
Robert D. Simoni et al, Benedict's Solution, a Reagent for Measuring Reducing Sugars: the Clinical Chemistry of Stanley R. Benedict, Journal of Biological Chemistry, 277 (16), p. 10?11, 2002 (http://www.jbc.org/content/277/16/e5.full)
http://pharmaxchange.info/press/2012/05/ultraviolet-visible-uv-vis-spectroscopy
-%E2%80%93-limitations-and-deviations-of-beer-lambert-law/