α complementation과 Lac selection(=color selection)의 이해

소개글

α-complementation의 이해
Lac selection(=color selection)의 이해

목차

1. α-complementation

2. Lac selection (또는 color selection)
(1) β-galactosidase
(2) X-Gal

본문내용

1. α-complementation

위의 그림을 보면 plasmid에 들어가 있는 lacZ는 Lac operon의 일부인데, Lac operon은 사이즈가 너무 크기 때문에 plasmid에 직접 삽입하지 못한다. (3075bp) 따라서 plasmid에는
β-galactosidase 중에서 일부분(alpha fragment)을 넣고, E. Coli의 chromosomal DNA에서 나머지 부분(omega fragment)을 만들게 한다. 그렇게 되면 plasmid의 alpha fragment와 E. Coli의 omega fragment는 서로 complex를 이루면서 완전한 β-galactosidase로써 기능을 할 수 있게 된다. 이것을 α-complementation이라고 한다.
E. coli는 원래 β-galactosidase를 만들 수 있는 유전자를 가지고 있는 미생물이므로 정상적인 균이라면 plasmid가 들어가지 않아도 푸른색 colony를 형성해야 한다. 그래서 실험실에서는 Lac operon이 망가져서 위와 같이 omega fragment만을 만들 수 있는 mutant를 사용한다.

참고 자료

없음