Exp 5. Isolation of Protein

소개글

본 실험보고서는 대구대학교 생명과학과
2011년 1학기 생화학 실험의 보고서 중 다섯 번째 실험인 Isolation of Protein(단백질 분리)입니다.
생화학 실험에 있어 가장 기초 되는 실험을 한 것이므로 인터넷 및 동과 다른 학생들의 실험보고서를 참고하여
성실하게 작성된 보고서 입니다. 보고서 중간 또는 마지막에 실험 때 촬영했던 사진 몇장을 첨부 하였습니다.
(차후 보고서 작성시에 도움이 되길 바랍니다)

* 과제 작성 완료후 참고문헌 작성시 아래의 문장을 같이 넣어 주시면 대단히 감사하겠습니다.

Jin Gwon Yu, 2011. Experiment of Biochemistry Report[Isolation of Protein]. Daegu university, College of natural sciences Department of LifeScience, pp. 1-10.

목차

Ⅰ.서론
1. 실험목적
2. 실험재료 및 도구
3. Additional explanations

Ⅱ.본론
1.실험과정
Protein Fractionation[단백질 순수분리]
Dialysis
Ion Exchange Chromatography
SDS-Electrophoresis
결과촬영

Ⅲ.결론
1. 결과
2. 고찰

-참고문헌

본문내용

1. 실험목적
여러 가지 방법의 단백질 분리 방법 중 대표적인 몇 가지를 습득하고, 불순물이 적은 순도 높은 단백질 분리하는 원리 및 분리하는 방법을 실습해 보는데 있다.
2. 실험재료 및 도구
Test Tube, 마이크로피펫, 팁, 원심분리기, 거즈, 달걀, 비닐장갑, 얼음, 버켓, 전자저울, 황산암모늄 첨가표,
Dialysis tube, 비커, 교반기, 가위, 색 실, 저온 보관실, SDS 전기영동 기기, 증류수, 양팔저울
* 시약: 0.1M Tris-Cl, 황산암모늄, Citrate(10mM pH 6.0), Tris-Cl(10mM pH 7.0, 8.0), Sodium bicarbonate, EDTA, ETOH(70%), 황산암모늄 10mM, 쇄균결과 10mM
3. Additional explanation(Baek, 2010)
a. Homogenizer
시료의 충분한 혼합, 교반, 분쇄에 사용되는데, 시료 속에서 dispersing shaft가 회전 할 때 dispersing shaft의 끝 부분의 rotor 구멍으로 시료가 강하게 빨려 들어가 Stator 사이에서 혼합되어 높은 안력으로 수평 또는 수직으로 분산되어 혼합된다. 시료의 입자크기 정도에 따라 rotor와 stator를 선택하여 사용하며, 회전속도는 적절한 속도를 이용한다.

<중 략>

62. 1시간 30분 뒤에 Well을 꺼내서 다듬고, Steining solution으로 염색시켰다.
63. 1시간 뒤에 탈색약으로 갈았다.
2011. 06. 15 수, 결과촬영
64. 오후 2시경 탈색약을 갈았다.
65. 오후 5시경 결과 촬영.
· 결론
°실험결과
Figure 1. 실험 결과 및 Size Maker
Figure 2. 2010 실험결과.
간단히 실험결과에 관하여 논해 보면, 다소 분간하기가 힘들다. 1, 2, 3, 6 Line을 제외한 나머지는 사실상 gel 상에서 이동하지 않는 것으로 봐도 되겠다. 1, 2, 3, 6 Line 중에서 희미하지만 3번 째 Line이 가장 잘 이동한 것으로 사료된다. Size Maker와 비교해 보면, 이동한 단백질의 분자량이 대략적으로 얼마나 되는지 추정이 가능한 Line이다.
° 고찰
단백질 순수분리에서 분자량의 차이를 볼 수 있는 SDS-Electrophoresis 전기영동까지 실험해 봤다. 실험 도중에 3개 조 중 4, 5조는 염색약의 이상으로 gel 손상되는 상황에 놓여 더 이상 실험이 진행 불가 하였다. 보고서 작성자인 본인이 속한 6조의 실험결과 또한 Baek, 2010을 참고하여 보시다시피 전기영동을 하고 난 결과가 좋지 못 하다.

참고 자료

한국생화학회, 1999. 실험생화학. 탐구당, pp. 84-89, pp. 95-110.
로드니 보이어, 2007. 생화학의 이해. 월드사이언스, pp. 84-85, pp. 110-111.
Dong yun Lee, 2010. Experiment of Biochemistry Report[Isolation of Protein]. Daegu university, College of natural sciences Department of LifeScience, pp. 18-23.
Seong hye Baek, 2010. Experiment of Biochemistry Report[Isolation of Protein]. Daegu university, College of natural sciences Department of LifeScience, pp. 27-32.