protein purification - overexpression and preparation of crude extracts

목차

1. Bacteriophage
2. Phage Display란?
3. Phage Display의 목적
4. Phage Display의 방법 및 원리
5. Phage Display 항체 Library
6. Phage Display를 이용한 실험 Data 분석
7. References

본문내용

Bacterial Cell을 감염시키는 바이러스
- 감염 된 세포는 바이러스의 복제에 필요한 숙주로 작용
- E. coli phages 들 사용 -> 쉽게 Culture, 빠른 생식
- Phage Display - > Filamentous phage 이용 (M13, F1, FD)

<중 략>

결합 된 Phage들은 Protein bonding interaction 을 저해시켜 Elution 된다.
- Acidic buffers, Alkaline buffers, Urea, addition of soluble ligand
- Elution 된 Phage들 중 특이성을 보이는 Phage를 새로운 Host cell에 감염시켜 Amplification
- Cycle을 2~3회 정도 돌려서 최적의 Binding sequence를 선택한다.

참고 자료

Strachan Tom, Human Molecular Genetics 3. 2004 Garland Publishing; pp-150-151
Renata Pasqualini, Erkki Ruoslahti. Organ Targeting in vivo using Phage display peptide libraries. 1996 Nature vol 380
Sakaguchi S, Sakaguchi N, Asano M, Itoh M, Toda M (1995) Immunologic self-tolerance maintained by activated T cells expressing IL-2 receptor alpha-chains (CD25). Breakdown of a single mechanism of self-tolerance causes various autoimmune diseases. J Immunol 155: 1151–1164
http://www.youtube.com/watch?v=RuROQSlCz18